江南大学生物工程专业本科生毕业设计（论文）.docx

编号本科生毕业设计(论文)题目：利用蛋白质组学技术鉴定进口啤酒大麦品种生物工程 学院 生物工程 专业学 号 学生姓名 指导教师 副教授二〇一四年六月毕 业 设 计论 文 任 务 书 生物工程学院 生物工程 专业一、题目利用蛋白质组学技术鉴定进口啤酒大麦品种二、课题来源及选题依据（研究背景）课题来源：江南大学自主科研计划青年基金(项目编号：JUSRP1015)课题依据：由于产地的原因，国产大麦品质欠佳，我国酿造啤酒的原料大麦长期依赖于进口，进口大麦的品质和质量直接关系到麦芽的制作和啤酒酿造的工艺，这就要求相关部门和麦芽、啤酒生产企业能够准确地对进口大麦的品种和品种纯度进行鉴定。目前，鉴定进口大麦品种的方法以感官鉴别为主，由于同一品种大麦籽粒因营养生长状况、结实的部位和气候环境条件等不同，部分籽粒在外形上存在较大的差异；同时，不同品种之间的大麦籽粒由于存在一定的亲缘关系而在外形上存在许多相似之处，所以用感官方法鉴别大麦的品种存在较大的偏差和难度。RAPD(随机扩增多态性)也可用于鉴定种子品种鉴定，它是DNA分子标记鉴定法中的一种利用扩增DNA片段长度的差异来检测生物个体的分子标记技术，利用扩增性片段多态性技术（RAPD）即DNA指纹技术，直接反应DNA分子的差异。但是RAPD检测受分析条件的影响很大，对其稳定性有很多的争论，在我国进口大麦的鉴定应用上也不成熟。近年来，国内外发展建立了多种生物化学及分子生物学方法可用于大麦品种和纯度的鉴定，其中主要采用的是种子醇溶蛋白电泳法。醇溶蛋白在成熟的种子中，约占总蛋白含量的40%-50%左右，足够用于蛋白质组学分析。同时，由于不同品种大麦的醇溶蛋白组成并不完全相同，品种之间存在着一定的差异，而蛋白质和多肽是基因的产物，特征多肽是相对稳定的，虽然环境因子可影响蛋白质的含量，但对特征多肽的有无是没有影响的，因此醇溶蛋白可以作为标记或“指纹”来鉴定大麦的品种。醇溶蛋白具有特殊的溶解性，可用乙醇溶液进行提取，方法简便，易于操作。蛋白质组学是在基因组学研究的基础上发展起来的，是对基因组学的延伸，它研究的经典方法包括双向凝胶电泳与生物质谱联用技术（2-DE/MS）。利用双向电泳技术（2-DE）将大麦种子醇溶蛋白按其等电点和相对分子量的不同有效分离开来，基质辅助激光解析电离-飞行时间串联质谱（MALDI-TOF MS/MS）有着较高灵敏度和准确性，能快速鉴定蛋白质，从而获得该蛋白相关性质。因此，可以利用蛋白质组学的方法建立进口啤酒大麦醇溶蛋白的标准图谱库和蛋白质标志物库，解决进口啤酒大麦品种鉴定缺乏准确的鉴定手段问题。三、本论文应达到的要求建立各主要进口大麦品种醇溶蛋白特征图谱库和蛋白标志物库，用于鉴定进口啤酒大麦品种及纯度。四、任务落实情况任务起止日期: 自2013年11月至2014年6月接受任务学生：班级 生工1004 学号 姓名 指导教师（签名）：　 　　中心（教研室）主任（签名）：　教学院长（签名）： 年 月 日摘 要作为啤酒的主要原料，啤酒大麦的品种和质量直接影响着麦芽及啤酒的品质。本文以国内4个进口量最大的澳大利亚啤酒大麦GAIRNER、HINDMARSH、SCHOONER、FAQ，及4个产量较大的国产啤酒大麦苏啤3号和6号、垦啤7号和10号为研究对象，建立了大麦醇溶蛋白的提取方法，得到这8种啤酒大麦醇溶蛋白标准双向电泳图谱，通过图像分析结合MALDI-TOF/TOF质谱鉴定技术，对各进口品种电泳图谱上的特征蛋白质点进行了鉴定，构建了以上4种进口啤酒大麦品种的蛋白标志物库，为啤酒行业中啤酒大麦品种鉴定提供了依据。关键词:啤酒大麦；品种鉴定；醇溶蛋白；蛋白质组学ABSTRACTMalting barley, the cultivar and properties of which directly affect the quality of malt and finished beer, is the main raw material for beer. This paper aims to set forth a proteomic method for malting barley cultivar identification in beer industry. Therefore, four mostly imported Australian malting barley, including GAIRDNER, HINDMARSH, SCHOONER and FAQ were collected for analysis, as well as high production domestic Supi#3 and Supi#6, Kenp