环境因素对微生物的影响讲解课件.pptVIP

1、化学因素对微生物的影响 2、生物因素对微生物的影响 环境因素对微生物的影响 试验目的 1、掌握圆片滤纸法（扩散法）检测多种化学药品对微生物生长的影响。 2、了解抗生素（青霉素）的抗菌范围，学习抗菌谱试验的基本方法（滤纸条法）。 实验材料 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基 试剂：碘酒、紫药水、红药水 、75%酒精、0.4%　84消毒液、1%过氧化氢、1%来苏（甲酚皂液）、 生理盐水 、青霉素溶液（0.64万单位/毫升） 仪器或其他用具： 无菌培养皿，滤纸条，滤纸片，镊子，试管架等 实验原理一：化学消毒剂抑菌的机理 ①使微生物蛋白质凝固变性，发生沉淀。如酒精、重金属离子等。 ②破坏菌体的酶系统，影响菌体代谢。如过氧化氢、84等。 ③降低微生物表面张力，增加细胞膜的通透性，使细胞发生破裂或溶解。如来苏儿等酚类物质. 1、重金属盐——可使蛋白质和核酸变性失活，或与细胞代谢产物螯合使之变为无效化合物。 2、有机溶剂——使蛋白质及核酸变性，破坏细胞膜透性使內含物外溢。3、卤族元素——例如碘可使蛋白质失活，氯与水发生反应产生强氧化剂——杀菌作用，如84消毒液。 4、低浓度染料——抑制菌生长，染料对细菌的作用具有选择性，G+比G-对染料更敏感。 　5、表面活性剂：十二烷基磺酸钠（洗衣粉、洗涤剂）能降低溶液的表面张力——作用微生物的细胞膜，从而使蛋白质变性。 　　　 　　　在涂有试验菌的平板上，放上浸有不同消毒剂的滤纸片，每个滤纸片吸取的液体量是相同的，在平板上，液体会向四周扩散，从而抑制或杀死滤纸片周围的试验菌，经过培养会在平板上形成一个抑（杀）菌圈，通过量抑（杀）菌圈的大小可以知道不同消毒剂的抑（杀）菌能力。 实验方法（1） 试验结果 实验步骤 1、每皿加0.1ml菌悬液 2、50℃左右的固体培养基倒入平板中与菌液混合均匀，静置凝固。 3、贴滤纸片： （1）在平板中央贴上浸有无菌生理盐水的滤纸片作为对照。 　　 （2）用镊子取无菌滤纸片分别浸入各种消毒剂润湿，在容器内壁沥去多余溶液，再将滤纸片分别贴在平板上相应位置，注意：不要在培养基表面拖动滤纸片，避免消毒剂不均匀扩散。 4、培养、观察：将上述平板倒置于37℃保温24h，观察并记录抑（杀）菌圈的大小。 　通常以石炭酸为标准确定化学消毒剂的杀（抑）菌能力，用石炭酸（酚系数）表示。将某种消毒剂作系列稀释，在一定时间及条件下，该消毒剂杀死全部试验菌的最高稀释倍数与达到同样效果的石炭酸最高稀释倍数的比值被称为该消毒剂的石炭酸系数，石炭酸系数数值越大，说明给消毒剂对试验菌杀（抑）菌能力越强。由于化学消毒剂的种类很多，杀菌机制各不相同，故石炭酸系数仅有一定的参考价值。（了解） 实验原理二：生物因素对微生物的影响 生物之间的关系： （1）互生 （2）共生 （3）寄生 （4）拮抗 拮抗 　又称抗生。通常指微生物间产生抗生素之类的物质，而抑制或杀死其它微生物。 　每种抗生素都有它固定的抗菌范围和抗菌谱。 例如青霉素只对革兰氏阳性菌具有抗菌作用；多粘菌素只对革兰氏阴性菌有作用，这类抗生素称为窄谱抗生素； 另一些抗生素对多种细菌具有作用，例如四环素、土霉素对许多革兰氏阳性菌和阴性菌都有作用称为广谱抗生素。 返回 培养 青霉素滤纸条 实验示意图： 间距5mm 梯度平板法 乳酸 　泡菜：当好氧菌和兼性厌氧菌消耗完了，其中残存氧气后就为各种乳酸细菌（植物乳杆菌、短乳杆菌等）繁殖生长提供了条件，通过它们产生的乳酸对其他腐败菌拮抗作用才保证了泡菜或青贮饲料的风味、质量和良好的保藏性能。 实验报告 1、记录 　不同化学药剂下不同菌种的抑菌圈直径 2、结果分析 　（1）分析自己的实验结果 （2）平行实验与对照实验的必要性 （3）滤纸版法的优势和局限性 3、绘图表示并说明青霉素对大肠杆菌，金黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌的抑菌效能，解释其原理 4、根据青霉素的抗菌机制，你平板上出现的抑菌带是致死效应还是抑制效应？与抗生素的浓度有无关系 准备工作 每2人配100ml 肉膏固体培养基； 每人包一包培养皿； 一支移液管。