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蛋白质的分离与纯化案例实例.ppt
蛋白质研究技术;第一节、蛋白质的分离与纯化;蛋白质分离纯化的基本原则 ;蛋白质分离纯化的方法;① 离心（centrifugation） ;① 离心（centrifugation） ;Ⅰ. 差速离心（differential centrifugation） ;差速离心（differential centrifugation） ; ;② 电泳（electrophoresis） ;Ⅰ. SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 （SDS-polyacrylamide gel electrophoresis，SDS） Ⅱ. 等电聚焦 （isoelectric focusing ，IEF ） Ⅲ. 双向电泳（two-dimensional gel electrophoresis） Ⅳ. 脉冲电泳（pulsed-field gel electrophoresis） ;Ⅰ. SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE） ;SDS ;SDS ;双向电泳（two-dimensional gel electrophoresis） ;双向电泳（two-dimensional gel electrophoresis） ;③ 层析（chromatography）;Ⅰ. 凝胶过滤层析（gel filtration chromatography ） ;Ⅰ. 凝胶过滤层析（gel filtration chromatography ） ;凝胶过滤层析（gel filtration chromatography ）;Ⅱ. 离子交换层析（ion-exchange chromatography）;离子交换层析（ion-exchange chromatography）;Ⅲ . 亲和层析（affinity chromatography）;亲和层析（affinity chromatography）;膜蛋白的分离;几种去污剂;;;;第二节 蛋白质的鉴定 ;① 分子量测定 ;Ⅰ. 渗透压（osmotic pressure）;Ⅱ. 沉降平衡（sedimentation equilibrium）;Ⅲ. 凝胶过滤层析（gel fitration chromatography） ;Ⅳ. SDS;Ⅴ. 激光解吸电离飞行时间质谱（laser desorption ionization-time of flight-mass spectrometry ， LDI-TOF-MS ）;激光解吸电离飞行时间质谱;② 等电点测定 ;③ 末端氨基酸残基测定; N-terminus 氨基酸残基测定;C-terminus 氨基酸残基测定 ;④ 蛋白质分子中的糖链;⑤ 蛋白质分子中的脂
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