第三章 食用菌制种技术　.docVIP

第三章 食用菌制种技术　　 教学目的与要求　　 本章要求学生重点掌握菌种、制种的概念；掌握菌种的类型和制种的工艺流程；明确制种所需的设备和重点掌握食用菌一级、二级和三级菌种培养基的制备过程。要求学生重点掌握灭菌、消毒的概念和区别，高压湿热灭菌、常压灭菌的方法；掌握常用的物理化学消毒方法；了解干热灭菌的原理方法。要求学生重点掌握菌种的扩大方法和培养方法；掌握菌种分离中常用的组织分离法的操作过程；理解菌种的保存原理及常用保存方法。　 教学重点与难点　　　 1、掌握菌种、制种的概念　　　 2、掌握菌种的类型和制种的工艺流程　　 3、重点掌握灭菌、消毒的概念和区别，高压湿热灭菌、常压灭菌的方法；掌握常用的物理化学消毒方法　　　 4、重点掌握菌种的扩大方法和培养方法　　 5、菌种分离中常用的组织分离法的操作过程　　 本章学时分配： 理论课 12学时　 实验课 12学时　 授课方式：多媒体　　 第一节 制种设备及程序　　 一、配料称量设备　　　 基本器具有试管、菌种瓶、塑料袋、孢子收集器、天平、温度计、湿度计、孢子收集器　　 试管有多种规格，常用的是21mm×200mm、25mm×200mm。　 菌种瓶一般容量是750ml、口径3cm的玻璃瓶，也有用罐头瓶、广口瓶生产的。效果以前种规格为好。但均要求能耐高温、高压，并要无色透明，便于检查菌丝生长和杂菌污染情况。　　 生产菌种的塑料袋要求用聚丙烯薄膜袋，常用的规格是17cm×34cm。塑料颈圈高3cm，直径3.5cm。用橡皮筋或塑料绳扎口。　 药物天平、托盘式天平，称量1000g，感量-1.0g；扭力天平，称量100g，感量0.01g；分析天平，称量100g，感量0.1—1.0g。可根据不同要求选用。　 孢子收集器是用来采收菌类孢子的一种装置，包括底盘、培养皿、三角架、纱布及有孔灯罩或钟罩等。　　 拌料设备主要有拌料机、铁铲等。　　 装料设备主要有装料机、铁铲等。　　　 二、灭菌设备　　　 主要有灭菌锅。灭菌锅是一个可以密闭并能耐受一定压力的金属锅。锅底（或夹层）盛水，加热后由于锅内（夹层）蒸汽增加而压力加大，温度或高，从而杀死锅内容物的杂菌菌体及孢子，达到灭菌的目的。灭菌锅有两种：　　 1．高压蒸汽灭菌锅，具有灭菌时间短，效果好，省燃料等优点。缺点是投资较大，目前工厂生产的手提式、直立式、卧式等，也有用钢板自制的。　 2．土蒸锅，是自制的常压蒸汽灭菌锅。　　　 三、接种设备　　　 接种设备有接种箱、接种室、超净工作台、负离子发生器　 接种箱用木材和玻璃制成，要求密闭。接种箱的前后装有两扇能启闭的玻璃窗，下方开两个小洞口，洞口装有布袖套。箱的大小可自行决定，以方便操作为宜。接种箱结构简单制造方便，成本低，且体积小，便于消毒彻底。　 接种室要求密闭、干燥，体积5m3—7m3为宜，外面应设有一间缓冲室，两室的上方要求安装紫外线灭菌灯及日光灯。　 超净工作台是利用过滤灭菌的原理，先将空气过滤，得到无菌空气，然后将无菌空气从风洞处打出，使工作台范围内成无菌状态。　 负离子发生器是采用强电离对空气进行灭菌的一种新方式。通过电离使用菌体蛋白质和核酸变性死亡，灭菌效果较理想。　 四、培养设备　 培养设备有培养室、电热恒温培养箱。　　　 培养室是培养菌种的场所。室内装有放置菌种的架子。要求干燥向阳，房间不宜过大，面积20—25m2，以培养5000—6000瓶菌种为宜 。　 电热恒温培养箱是采用自然对流通外式的结构，冷空气从底部风孔进入，经电热器加温后，从两侧对流孔间上升，并从内胆左右侧小孔进入内室，再经箱顶的封顶盖调节，使内室温度均恒。　　　 温度计、湿度计。用来观察培养室、栽培室等处温度、湿度、以便根据情况加以调节。常用的有棒形温度计和干湿球温度计。　 五、制种的程序（工艺流程）　　 （一）菌种的概念和类型　　　 在自然界中，食用菌繁衍后代依靠孢子，孢子借风力传播到适宜的环境下，萌发成菌丝体，菌丝体生长繁衍到生理成熟后，在一定的条件下，就可形成子实体。在人工栽培食用菌时，孢子虽然是它的“种子”，但一般不用孢子直接播种（有些为异宗配合），而是用孢子或子实体组织细胞经培养萌发形成的纯菌丝体作为播种材料。　　　 因此，通常所指的菌种，实际上是经过人工培养并进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。　 制种是食用菌生产最重要的环节。菌种的优劣，直接影响到食用菌的产量和质量。　　 优良菌种包含两大方面的含义：一是指菌种本身的生物学特性，如高产、优质、抗逆性强；二是指菌种纯度高、无虫害、无杂菌。因此培育优良的菌种，是提高食用菌生产水平的重要环节。　 人工培养的菌种，根据菌种培养的不同阶段，可分为母种、原种和栽培种3类。一般把从自然界中，首次通过孢子分离或组织分离而得到的纯菌丝体称为母种，或