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B7H3过度表达对小鼠前列腺癌细胞多西紫杉醇敏感性及18F-FDG的摄取影响的体外研究中文摘要目的本课题利用获赠的RM1-GFP及RM1-GFP/B7H3小鼠前列腺癌细胞，通过体外实验了解B7H3过度表达对激素非敏感性细胞RM1 对于化疗药物多西紫杉醇敏感性及体外摄取18F-FDG的影响，评估B7H3作为药物分子靶点的可行性。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法在不同时间及药物浓度下检测两组细胞的生长抑制情况及应用流式细胞仪检测两组细胞细胞周期重置情况。运用蛋白质印迹（westernblot）法测定两组细胞B7H3的表达。同时测定两组细胞在不同细胞数下18F-FDG的摄取，选取合适细胞数，两组细胞在不同多西他赛浓度及时间下对于18F-FDG摄取，并根据公式：细胞摄取抑制率=(1??加药组细胞摄取率)×100%，计算对照组细胞摄取率各自相应的细胞摄取抑制率。运用蛋白质印迹（westernblot）法测定两组细胞葡萄糖转运蛋白-1（Glut-1）的表达及加药前后两组细胞表达情况的比较。结果两组细胞分别在加入药物24、48小时后均呈剂量及时间依赖性，除在24小时5nmol/L及10nmol/L浓度下RM1-GFP、RM1-GFP/B7H3两者抑制率分别为（16.60±3.20）%vs（17.06±2.15）%及（25.68±2.97）%vs（23.69±2.75）%差异无明显统计学意义外（t值分别为-0.245、0.854，P值分别为0.82、0.44），其余浓度下两组抑制率差异均有统计学意义（P0.05），且RM1-GFP组显著大于RM1-GFP/B7H3 组。流式细胞仪分析两组细胞均出现了G2/M期阻滞，其程度随时间的增加而增加，且RM1-GFP 组显著大于RM1-GFP/B7H3组。两组细胞在不同药物浓度下24小时及48 小时18F-FDG摄取抑制率呈剂量依赖性，RM1-GFP组在各个不同浓度下18F-FDG摄取抑制率显著大于RM1-GFP/B7H3组。蛋白质印迹（westernblot）法对于Glut-1 表达结果提示两组细胞Glut-1的表达加药组小于未加药组，且RM1-GFP/B7H3组在同样条件下Glut-1的表达明显高于RM1-GFP。结论B7H3的高表达能够显著增加激素非依赖性小鼠前列腺癌细胞RM1在体外对于多西紫杉醇的耐药性及对于18F-FDG的摄取，表明其在肿瘤化疗药物如多西紫杉醇耐药机制方面的重要作用，具体机制还有待进一步探索。关键词：B7-H3；前列腺癌；18F-FDG；Glut-1作者：盛威指导老师：平季根B7H3过度表达对小鼠前列腺癌细胞多西紫杉醇敏感性及18F-FDG 的摄取影响的体外研究英文摘要TheeffectofB7H3overexpressiontothesensitivtiyofDocetaxeland18F-FDGuptakeonratprostatecancercellsinVitro AbstractObjectiveThesubjectusedthedonatedRM1-GFPandRM1-GFP/B7H3ratprostatecelltogetacquaintancetotheeffectofB7H3overexpressiontothesensitivtiyof Docetaxeland18F-FDGuptakeonandrogeninsensitiveratprostatecancercellsthrough vitroexperiments,andassessthefeasibilityofB7H3asdrugmoleculartarget.MethodsThefourmethylthiazolyltetrazolium(MTT)assaywasusedforthedetectionofinhibitionoftwogroupsofcellgrowthindifferenttimeanddrug concentrations.Flowcytometrywasusedforthedetectionofcellcycleresetofthistwo groups.UsedWesternblottodetecttheexpressionofB7H3ofthetwogroup cells.Simultaneously,18F-FDGuptakeoftwogroupsofcellsindifferentcellnumberwas determined.Selectedtheappropriatecellnumber,thendetectedthetwogroupsofcellsatdifferentconcentrationandtimeofdocetaxelfor18F-FDGupta