冬虫夏草研究报告.pptVIP

冬虫夏草的研究进展 报告人：王灿 摘要 1.冬虫夏草的简介 2.冬虫夏草的活性鉴定 3.冬虫夏草菌的分离 4.冬虫夏草的培养，这里冬虫夏草的培养又可以细分为1）无性阶段的培养；2）有性阶段的培养 1.冬虫夏草简介： 冬虫夏草，简称虫草。是中国传统的名贵中药材，它是由肉座菌目麦角菌科虫草属的冬虫夏草菌寄生于高山草甸土中的蝠蛾幼虫，使幼虫僵化，在适宜条件下，夏季由僵虫头端抽生出长棒状的子座而形成(即冬虫夏草菌的子实体与僵虫菌核(幼虫尸体)构成的复合体)。 它主要产于中国青海、西藏、四川、云南、甘肃、贵州等省及自治区的高寒地带和雪山草原。 下图是冬虫夏草的图片： 2.冬虫夏草的形态特征： 冬虫夏草菌子囊菌的子座出自寄主幼虫的头部，单生，细长如棒球棍状，长3～11厘米；不育柄部长3～8厘米，直径1.5～4毫米；上部为子座头部，稍膨大，呈圆柱形，长1.5～4厘米，褐色，除先端小部外，密生多数子囊壳；子囊壳大部陷入子座中，先端凸出于子座之外，卵形或椭圆形，长250～500微米，直径80～200微米，每一子囊壳内有多数长条状线形的子囊；每一子囊内有8个具有隔膜的子囊孢子。寄主为鳞翅目、鞘翅目等昆虫的幼虫，冬季菌丝侵入蛰居于土中的幼虫体内，使虫体充满菌丝而死亡。夏季长出子座 3.虫草的活性成分： 虫草真正的潜在价值或许是其各类代谢产 物，迄今人们已从虫草及其无性型中检测中分离到多种生物活性物质。虫草除了含粗蛋25.32%，粗纤维18.53%，碳水化合物28.90%，灰4.10%，水分10.48%外，还含有8.40%的脂肪。 用来检测从草的活性的指标主要是如下几类： ① 甘露醇；据药理研究及临床报道,甘露醇具有利尿、提高血浆渗透压、镇喘祛痰、抗自由基等作用,且对多种疾病有一定的疗效,故被认为是冬虫夏草的活性成分之一。甘露醇含量的测定方法文献报道较多的是氧化还原法、高效液相色谱法、气相色谱法、薄层扫描法。 ② 核苷类物质；核苷类物质(腺苷、尿苷、鸟苷) 为冬虫夏草有效成分之一,尤以腺苷具有明显的药理作用,如改善心脑血液循环、防止心律失常、抑制神经递质释放和调节腺苷酸环化酶活性等。冬虫夏草中腺苷等核苷类物质的含量以往多采用薄层紫外分光光度法或高效液相色谱法测定。 ③ 麦角甾醇；麦角甾醇是真菌类的特征甾醇,为一种重要的维生素D2 ④ 虫草多糖；虫草多糖的药理作用主要是抗肿瘤、降糖、抗免疫损伤性大鼠 肝纤维化、提高免疫等。虫草多糖的提取常用乙醇沉析法。 这4种都是能鉴定从草的药理活性的重要指标，研究表明各地的从草的活性成分都不一样，以甘南，西藏等地的天然虫草成分最高，又普遍高于人工培养的虫草。 4.虫草的生物学特性 自然界中的虫草能以两种相对独立的生活方式存在,即有性阶段（形成子座）和无性阶段（形成菌丝体产生分生孢子）。在人工栽培和发酵中通常运用其无性型。 在虫草的无性阶段，能从虫体上分离出多个不同种的霉菌种属（如蝙蝠蛾拟青霉菌，被毛孢菌等）。但经李增智等应用PCR技术确定了中国被毛孢和冬虫夏草的90%的相似率足以证明中国被毛孢为冬虫夏草的无性型。因此在无性阶段是对被毛孢菌（即冬虫夏草菌种）的培养。 5.虫草菌的分离和培养 5.1冬虫夏草菌的分离 根据王忠等人在（甘肃冬虫夏草菌的研究）的报道中可以得知可以从三种不同的组织位置分离得到冬虫夏草菌: （1）子囊孢子的分离培养； （2）僵虫组织的分离培养；先用自来水洗净僵虫体表面, 再用无菌水清洗后放入浓度为 1 gkg 的升汞溶液中消毒 5m in, 然后再用无菌水清洗。在无菌条件下切去僵虫外皮, 避开肠管, 将白色组织切成小米粒大小的块, 接种于分离培养基上, 置于 15～ 18 25 ℃温度条件下培养。 （3）子座分离培养；取新鲜冬虫夏草子座或从僵虫头部切下子座芽, 将其洗净后放入浓度为 1 gkg 的升汞溶液中消毒 5 m in, 再用无菌水洗去升汞液, 剖开子座或子座芽, 取其中白色菌丝束埋入培养基中, 置于 15～ 18 ℃温度条件下培养 5.2虫草的培养 虫草的培养可以分为两步：1.对冬虫夏草菌菌丝体的培养；2.让菌体对蝙蝠蛾类虫体进行侵染。 1.冬虫夏草菌的培养;根据郭素平等人在（冬虫夏草菌丝的实验研究）一文中，我们得知其培养的条件，和不同