天净沙系列细菌细胞膜蛋白提取试剂盒-天恩泽.PDFVIP

列 系 沙 净 天 CAT#: 100929-50 低温运输和4℃保存，DNase I 需低温 保存 细菌细胞膜蛋白提取试剂盒 Bacterial Membrane Protein Isolation Kit 使用手册V1.0 北京天恩泽基因科技有限公司 北京市海淀区上地信息路26 号北京市留学人员海淀创业园中关村创业大厦506 网址： ；电话：400-6765278；电邮：order@ 产品及特点 本试剂盒是基于超速离心的快速提取细菌膜蛋白的试剂盒。其原理是裂解细 胞后，通过超速离心分离出细胞膜和附着的蛋白质。跟传统的密度梯度离心法和去 污剂法相比，本方法具有下列特点： 1. 一步式分离细胞膜和膜蛋白，密度梯度离心法简单快捷。 2. 膜蛋白纯度高，能够去除各种胞浆蛋白的污染，也能去除松散附着在细胞膜上 的蛋白，所得膜蛋白主要是整合蛋白。 3. 膜蛋白完整性好，主要是由于实际中有抑制蛋白酶成分。 4. 回收效率高，一般能得到相当于总蛋白量6%的膜蛋白。 5. 可用于E. coli，S. typhimurium ，K. aerogens，P. aeruginosa ，C. crescentus 等细菌。 规格及成分 成 分 编 号 50 次规格 溶液A 100929A 125 mL 溶液B 100929B 25 mL 溶液C 100929C 250 mL DNase I 干粉 131230 3.5 mg 使用手册 100929sc 1 份 运输及保存 低温运输和保存， DNase I 需要低温保存。有效期一年。 自备试剂 膜蛋白溶解液（取决于后续实验。如果后续实验为 SDS，则用 1 × SDS上样液作为溶解液；如果用于2D 电泳，则使用1×等电点电泳上样 液作为溶解液）。 使用方法 准备：第一次使用本试剂盒时需要将所有DNase I 干粉倒入溶液B 中，轻柔颠倒 使 DNase 干粉溶解。未用完的部分需要放-20℃保存，最好在一个月内完，否则 DNase 将逐渐失去活性。此外，最好在实验前 1 小时将溶液B 冰浴预冷。 用法一：小量制备（主要用于上样量比较小的SDS电泳等实验） 1、 收集20-40 mL 过夜培养的细菌饱和培养液（OD420 在 1.5左右即可），2500 g 室温离心 10 分钟后弃上清。 2 、 加入2 mL 溶液A ，轻柔吹打，将细菌重悬于溶液A 中。 3、 2500 g 室温离心 10 分钟后弃上清。 4 、 加入0.5 mL 溶液B （必须已经提前加入了DNase I 干粉），轻柔吹打使细菌 重悬。注：如果细菌起始量没有20-40 mL，溶液A 的用量可以等比