3叶绿体色素理化性质（有荧光）和种子活力.pptVIP

基本知识 叶绿体中含有叶绿素(叶绿素a与b)和类胡萝卜素(胡萝卜素和叶黄素)。叶绿素的化学性质很不稳定，容易受强光的破坏，特别是当叶绿素与蛋白质分离以后，破坏更快，而类胡萝卜素则较稳定。 实验内容 1. 叶绿体色素的提取 2. 叶绿素的荧光现象 3. 叶绿素的皂化作用 4. 叶绿素与类胡萝卜素的吸收光谱 5. 氢和铜对叶绿素中镁的取代 一、叶绿体色素的提取 实验原理 叶绿素(叶绿素a与b)和类胡萝卜素(胡萝卜素和叶黄素) 均不溶于水，而溶于含有水的有机溶剂，故常用95％的酒精或用酒精、丙酮和水的混合液提取或80％丙酮提取。 实验步骤 1. 称取5g鲜菠菜，放在研钵中。 2. 量取5mL 95%酒精和少许CaCO3粉末及石英砂，研磨。 3. 材料研碎之后加入15mL 95%酒精搅匀。 4. 研磨液用粗滤纸过滤，收集滤液备用。 注意事项： 1、CaCO3粉末不要加过量。 2、过滤时研钵上的叶绿素要尽量冲干净。 3、为了避免叶绿素光分解，操作时应在弱光下进行，研 磨时间应尽量短些 。 4、叶绿体色素提取液不能混浊 。 二、叶绿素的荧光现象 实验原理 叶绿素吸收光量子而转变成激发态，激发态的叶绿素分子很不稳定，当它变回到基态时可发射出红光量子，因而产生红色荧光。 当光透过叶绿体色素溶液时，被色素吸收了红光,余下互补色绿光，因而透射光为绿色。 实验步骤 实验步骤 实验步骤 1. 将已分层的试管溶液，用分光镜观察两类色素的吸收光谱，首先让没有溶液的部分对准光孔，然后上层黄色素溶液对准进光孔；最后将下层绿色素部分对准进光孔。把观察的结果用简单的图表示出光谱的变化。 2.将观察到的结果绘图。 实验原理 叶绿素分子不稳定，遇酸时卟啉环中央的镁可以被氢离子所取代而成褐色的去镁叶绿素。去镁叶绿素遇铜则成为铜代叶绿素，铜代叶绿素在光下很稳定。 实验步骤 1. 取叶绿体色素提取液5mL，加入一滴浓盐酸，搅动，观察溶液变化。 2. 取上一步去镁叶绿素溶液，加入少许醋酸铜，缓慢加热，观察溶液变化。 思考题 1. 在用新鲜叶片提取叶绿体色素时，为什么要加入一定量的CaCO3? 2．新鲜的植物叶片是否能够用不含水的有机溶剂提取？为什么？ 3．对着光源和背着光源观察时，叶绿素提取液的颜色为何不同？ 基本知识 种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据，与播种时的用种量直接有关。 测定种子生活力常采用发芽实验，即在适宜条件下，让种子吸水萌发，在规定天数内统计发芽的种子占供试种子的百分数。 实验内容 溴麝香草酚蓝法（ BTB 法） 氯化三苯基四氮唑法（ TTC 法） 红墨水染色法 实验材料 玉米种子 注意：以下实验中的对照都是沸水煮死的种子。 计算公式 计算公式 计算公式 详细观察与记录三个实验内容相应的实验结果，并分析原因。 特别提醒 用酒精灯加热请注意加热方法，不要盖试管塞，试管口不要朝有人的地方，注意及时正确熄灭酒精灯。 所有试剂、药品都配有专用的滴管或药勺，用完立即放回原试剂瓶，不得乱放，并将其放回架子上，不要放在桌面上，以防打翻。尤其是使用浓盐酸、苯时更要注意！及时盖塞！ 含苯废液请倒进废液瓶中，严禁倒入下水道！ 结果与讨论 思考题 比较以上测定种子生活力的几种方法各有什么优缺点？ * 实验3-1 叶绿体色素提取及其理化性质 实验目的： 了解叶绿素提取分离的原理以及它们的一些理化特性。 亲水 研磨法提取光合色素 材料剪碎 加入有机溶剂 研磨、匀浆 过滤 提取液 叶绿素的荧光现象 取少许叶绿素提取液分别进行透射光和反射光观察。 注意事项：如果太浓可以用95%酒精稀释 三、叶绿素的皂化作用 实验原理 叶绿素是一种叶绿酸的酯，故可与碱起皂化反应而生成醇（甲醇和叶绿醇）和叶绿酸的盐，产生的盐能溶于水中，可用此法将叶绿素与类胡萝卜素分开。 皂化叶绿素 叶绿醇 3mL叶绿体提取液 1mL 20%KOH-甲醇溶液 3mL 苯 摇匀 摇匀 贴试管壁缓慢加入1mL蒸馏水 苯溶液-叶绿素 乙醇溶液-皂化的叶绿素 苯溶液-类胡萝卜素 乙醇溶液-部分叶黄素 勿激烈摇荡 四、叶绿素与类胡萝卜素的吸收光谱 主要光合色素的吸收光谱 2：叶绿素a；3：叶绿素b； 5：类胡萝卜素 实验原理 叶绿素与类胡萝卜素都具有光学活性，具有不同的吸收光谱，叶绿素吸收红光和兰紫光，类胡萝卜素吸收兰紫光。 类胡萝卜素的吸收光谱