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DB33 T 473-2004 β-内酰胺类、磺胺类和氨基糖苷类注链霉素型药物残留量的测定 注放射免疫快速检测法 ICS 07.100.30 C 53 浙 江 省 地 方 标 准 DB33 DB33/T 473—2004 β-内酰胺类、磺胺类和氨基糖苷类 链霉素型药物残留量的测定 放射免疫快速检测法 Determination of beta-lactam,sulfa drugs and aminoglycoside-St residues--Radioimmunoassay 2004-02-04发布 2004-03-04实施 浙江省质量技术监督局 发布 DB33/T 473—2004 I 前 言 本标准由杭州市质量技术监督局、杭州市农业局共同提出。 本标准由杭州市农产品检测站负责起草。 本标准由浙江大学动物科学学院、华粤行仪器有限公司参加起草。 本标准主要起草人：胡学肖、杨华、周方、袁谦、方维焕、邹黎明、李容、姚建红。 DB33/T 473—2004 1 β-内酰胺类、磺胺类和氨基糖苷类链霉素型药物残留量的测定 放射免疫快速检测法 1 范围 本标准规定了β-内酰胺类、磺胺类和氨基糖苷类链霉素型药物残留量的测定方法。 本标准适用于牛乳及其制品（生鲜乳、灭菌乳、乳粉等）和畜、禽等动物肌肉及内脏中β-内酰胺 类和磺胺类药物残留的测定，以及牛乳及其制品中氨基糖苷类链霉素型药物（链霉素、双氢链霉素、庆 大霉素）残留的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注明日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研 究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注明日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验用水规格和试验方法 3 原理 样品中残留的药物和药片中标记了 14 C或 3 H的药物竞争结合其特异性受体，经免疫竞争反应后离心， 取沉淀物加入闪烁液，在液体闪烁计数器中计数 1分钟，将计数值与标准溶液测定的计数值进行比较， 计算待测样品中药物的残留量。 4 试剂和溶液 4.1 水 应符合 GB/T 6682二级用水要求。 4.2 闪烁液 由放射免疫试剂盒公司提供。 4.3 牛乳及其制品测定用 CHARM II放射免疫试剂盒或其它公司同类产品 4.3.1 牛乳及其制品中 β-内酰胺类药物测定用放射免疫试剂盒。包括：绿色和黄色药片、牛乳阴性 对照浓缩干粉、青霉素 G标准干粉等。 4.3.2 牛乳及其制品中磺胺类药物测定用放射免疫试剂盒。包括：白色和粉红色药片、牛乳阴性对照 浓缩干粉、磺胺二甲嘧啶标准干粉等。 DB33/T 473—2004 2 4.3.3 牛乳及其制品中氨基糖苷类链霉素型药物测定用放射免疫试剂盒。包括：白色和绿色药片、牛 乳阴性对照浓缩干粉、链霉素标准干粉等。 4.3.4 牛乳阴性对照液配制：取出待测药物试剂盒中的牛乳阴性对照浓缩干粉瓶，加入 100mL 40 o C 左右的水，震荡混匀，冷却至 0～7 o C，备用。 4.4 动物组织测定用 CHARM II放射免疫试剂盒或其它公司同类产品 4.4.1 动物组织中β-内酰胺类药物测定用放射免疫试剂盒。包括：绿色和黄色药片、组织阴性对照浓 缩干粉、青霉素G标准干粉、萃取缓冲液干粉和M2缓冲液干粉等。 4.4.2 动物组织中磺胺类药物测定用放射免疫试剂盒。包括：白色和粉红色药片、组织阴性对照浓缩 干粉、磺胺二甲嘧啶标准干粉、萃取缓冲液干粉和M2缓冲液干粉等。 4.4.3 萃取缓冲液配制：取出待测药物试剂盒中的萃取缓冲液干粉瓶，将瓶中干粉全部转移入 1000mL 容量瓶中，用水定容至刻度，震荡混匀，备用。 4.4.4 M2缓冲液配制：取出待测药物试剂盒中的 M2缓冲液干粉瓶，加入 50mL水，震荡混匀，备用。 4.4.5 组织阴性对照液配制：取出待测药物试剂盒中的组织阴性对照浓缩干粉瓶，加入 10mL水，震荡 混匀，将其全部加入 30.0mL萃取缓冲液（4.4.3）中，在锥形瓶中混合均匀，备用。 4.5 青霉素 G标准溶液和阳性对照液配制 4.5.1 青霉素 G标准溶液配制 4.5.1.1 青霉素 G标准贮备液：浓度为 1000ng/mL。 取出β-内酰胺类药物试剂盒（4.3.1或 4.4.1）中的青霉素 G标准干粉瓶，准确加入 10mL水，震 荡混匀，备用。 4.5.1.2 牛乳及其制品测定用青霉素 G标准中间工作液：浓度为 50ng/mL。 吸取 2.0mL青霉素 G标准贮备液