新生大鼠反复惊厥对大脑皮质区糖皮质激素受体表达的影响-儿科学专业论文.docx

硕士学位论文中文摘要中文摘要目的现今普遍认为除兴奋毒性机制氧自由基损伤外炎症在发育中脑损伤病理生理过程中占有重要地位。糖皮质激素(glucocorticoid，GC)作为强有力的抗炎物质，能有效地抑制致炎症信号和相关基因表达，但在脑发育期不恰当应用GC可能严重影响脑发育。在脑内，GC是通过糖皮质激素受体(glucocorticoidreceptor,GR)发挥作用。本实验通过研究新生期大鼠反复惊厥对皮质区GR表达的影响，探讨脑内GR和发育期脑损伤变化之间关系。方法48只生后7天(postnatalday7，PN一7d)的SD大鼠随机分成惊厥组和对照组，每组24只，惊厥组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作1次，每次持续30min，连续6d；对照组同样操作但不吸入三氟乙醚。两组大鼠于反复惊厥后(afterrecurrentseizures，ARS)1d、3d、7d随机各选取8只大鼠断头去脑，分别采用Westernblots及免疫组织化学方法观察大鼠大脑皮层GR表达的变化。结果(1)通过Westernblots发现在大脑皮质区GR生后即有表达，随着日龄的增加大脑皮层GR的表达呈现一定的规律性。在生后早期新生大鼠GR主要表达于胞浆，而后胞核中表达迅速增加。与正常对照组相比较，惊厥组大鼠ARS—ld(PN--13d)及ARS．7d(PN一19d)时，胞浆蛋白中GR表达无显著性差异(P0．05)；ARS一3d(PN一15d)惊厥组大鼠皮层胞浆蛋白中GR表达显著降低(PO．05)。与正常对照组相比较，惊厥组大鼠ARS--ld(PN一13d)I硕士学位论文及ARS--3d(PN一15d)时皮层胞核蛋白中均未检出GR的表达，ARS．7d(PN--19d)时惊厥大鼠皮层胞核蛋白中GR表达显著降低(PO．05)。(2)通过免疫组织化学方法发现GR在皮质表达丰富，随着日龄的增加大脑皮层各叶GR的表达呈现一定时相性和区域性。在PN一13d时，GR阳性部位为胞浆，在PN一15d、PN一19d时胞核区也出现阳性表达。在ARS．1d(PN一13d)时，惊厥组大鼠顶叶区GR免疫化学累计光密度(accumulateopticaldensity，AOD)明显低于正常对照组(P0．05)，而在额叶、颞叶区两组无显著性差异(PO．05)；在ARS．3d(PN一15d)时，惊厥组大鼠皮层顶叶、颞叶区GR免疫化学AOD明显低于正常对照组(PO．05)，在额叶区无显著性差异(PO．05)；在ARS．7d(PN一19d)时，惊厥组大鼠皮层顶叶、颞叶和额叶区GR免疫化学AOD明显低于正常对照组(PO．05)·结论(1)皮质区GR随脑发育成熟表达呈现一定规律性及分布特点，与脑发育过程密切相关。(2)新生大鼠反复惊厥造成大脑皮层GR表达的异常，可能参与反复惊厥所致发育期脑急性损伤。关键词惊厥；新生；糖皮质激素受体；脑；发育Ⅱ硕士学位论文英文摘要ABSTRACTObjective：Toinvestigatetheshort—termeffectsofflurothyl—inducedneonatalrecurrentseizuresonglucocorticoidreceptor(GR)expressionsinratbrain．Methods：48ofpostnatal(PN一)7dSprague—Dawleyratsweredividedrandomlyintotwogroups：thecontrolgroupandtheseizuregroup．Seizureswereinducedbyinhalantflurothyldaffyinsixconsecutivedays．Thebrainsofratsweresampledonafter-recurrent·seizure(』气JRS)一ldON一13d)，ARS一3d(PN-15d)andARS一7d(PN-19d)．TheexpressionsofGRproteinincerebralcortexweredetectedbyimmunohistochemistryandWesternblotsmethods．Results：TheexpressionofGRinthecerebralcortexofratpuphasbeenfoundbywesternblotandimmunohistochemistrymethodsincePN·13d．TheexpressionofGRwasfoundinthecellularplasmaonPN-13d，andthatWasfoundinthecellularnucleusandplasmaonPN．15dandPN-19d．Bywesternblotmethod，wefoundthatth