兔脑缺血再灌注后细胞凋亡机制的研究-影像医学与核医学专业论文.docx

兔脑缺血再灌注后细胞凋亡机制的研究 摘要目的分析兔脑组织急性缺血及缺血再灌注后细胞凋亡的动态变化，及其与存活素(Survivin)基因和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)的关系，探讨兔脑缺血再灌注后细胞凋亡的机制。 方法将58只成功的大脑中动脉缺血再灌注新西兰兔模型随机分为永久缺 血组(A组)和再灌注组(B组)。其中A组(Al—A6)分为缺血l h、3h、 6h、l 2h、24h、48h组，每组5只；B组(B1．B6)缺血1 h拔线再通后分为再 灌注Oh(5只)、2h(5只)、5h(5只)、1 1 h(4只)、23h(5只)和47h (4只)组。另取l 0只作假手术组，分别作为A、B组的对照组。每组分 别于各时间点进行MRI弥散成像，之后立即断头取脑，分别行HE染色、 细胞凋亡、Survivin及nNOS检测，显微镜下观察缺血组织的形态改变， 记录细胞凋亡、Survivin及nNOS阳性细胞数。 结果缺血后永久缺血组与再灌注组凋亡细胞均呈先上升后下降的趋势，且再灌注组各时间点幅度较永久缺血组低，两组分别于1 2h及23h达高峰， 而后逐渐下降。再灌注组Survivin各时间点阳性细胞数均高于永久缺血组，高峰出现于缺血1 2h(再灌ll h)，永久缺血组凋亡与Survivin基因之间具 明显相关性(r=0．963，P=0．002)。再灌组各点nNOS表达均明显高于永 久缺血组，总体变化趋势先下降后上升，底峰均位于缺血1 2h(再灌11 h)， 再灌注组nNOS与凋亡变化趋势相近，方向相反(r=一0．942，P=0．005)。 结论1．脑组织缺血可诱发Survivin基因表达上调，这种改变在一定程度 上能够对抗由脑缺血引起的细胞凋亡，从而对脑组织起到保护作用。而在 再灌注期nNOS的变化趋势与凋亡变化呈反相关，这提示nNOS的产生可 能对濒临凋亡的神经细胞有保护作用。2．缺血6h为临床溶栓治疗的时间窗，在此时间窗内进行再灌流有可能挽救部分半影区组织。硕士研究生：刘松(医学影像学) 指导教师：隋庆兰教授关键词：脑缺血；凋亡；Survivin；nNOSExperimental study of cell apoptosis mechanism with focal cerebralischemia and reperfusion in rabbit AbstractObjective To analyze the dynamic changes of apoptosis in brain of rabits after acute ischemia-reperfusion．and relationship with nNOS and Survivin,further to investigate the apoptosis mechanism ofbrain cell in rabbits after ischemia and reperfusion．Methods58 New Zealand white rabbits were randomly divided into permanentischemia group(group A)and reperfusion group(group B)，and made into middle cerebral artery ischemia model using introluminal thread technique．Group A(Al-A6)were separated into several group by time after ischemia,1 h，3h，6h,1 2h,24h，48h，each group has five ones．Group B(Bj—B6)ischemialh and reperfusion in Oh(5)，2h(5)，5h(5)，lth(4)，23h(5)，47h(4)．Another 10 Was false surgery group，．as control group to group A and B．Each took diffusion imaging in different time point,and immediately decapitated brain．Respectively go on州th HE staining,detection to apoptosis．Survivin and nNOS．Be attention to the morphological changes of ischemic tissue under microscope，and record the positive cel