17-18版：5.1 DNA的粗提取与鉴定（步步高）.pptx

;;一、DNA的理化特性、提取及鉴定的原理;;;2.DNA的溶解性 (1)DNA在NaCl溶液中的溶解度 DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，其中在 NaCl溶液中溶解度最低。 (2)在酒精溶液中的溶解性： 不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些 溶于酒精溶液。;3.DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 (1)对酶的耐受性：蛋白酶能水解 ，但对 没有影响。 (2)对温度的耐受性：大多数蛋白质不能忍受 的高温，而DNA在 以上才会变性。 (3)对洗涤剂的耐受性：洗涤剂能够瓦解 ，但对 没有影响。 4.DNA的鉴定 在 的条件下，DNA与 反应呈现蓝色。;;①低于0.14 mol/L时：___________________________________________ 。 ②高于0.14 mol/L时：___________________________________________ 。;答案　提取获得的DNA滤液中含有蛋白质、多糖和RNA等多种杂质，用2 mol/L的NaCl溶液溶解DNA，然后过滤获得滤液，能够去除该条件下不能溶解的杂质；调节NaCl溶液的物质的量浓度为0.14 mol/L，使DNA析出，然后过滤获得析出物，能够去除该条件下仍然能够溶解的杂质。;答案　不同。原因如下： (1)蛋白质变性是指蛋白质在某些物理或化学因素作用下其特定的空间构象被改变，从而导致其理化性质的改变以致生物学活性丧失。 (2)DNA变性是指DNA分子在高温等条件下，由稳定的双螺旋结构解聚为无规则线性结构的现象，变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂，当温度等条件恢复正常后，DNA的结构尚能恢复。;归纳总结　;;解析　用高浓度的NaCl溶液溶解DNA，能除去在高盐溶液中不能溶解的杂质，用低浓度的NaCl溶液使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质，因此，反复溶解、析出DNA，能除去与DNA溶解度不同的杂质。从题图可以看出，DNA在浓度为0.14 moL/L的NaCl溶液中的溶解度最小，因此最适合析出DNA。随着NaCl溶液浓度的增大或减小，溶解度均逐渐增大。;;解析　DNA不溶于酒精，而蛋白质等杂质溶于酒精，A项不正确。 蛋白质比DNA对温度的耐受性更差，因此更容易变性，B项不正确。 DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最小，而蛋白质在该浓度的NaCl溶液中溶解度较大，因此可将DNA与蛋白质分离，C项不正确。 嫩肉粉中的木瓜蛋白酶只能催化蛋白质水解，而对DNA没有影响，因此，可将DNA与蛋白质分离，D项正确。;答案　利用了酶的专一性，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶只能催化蛋白质水解，不能催化DNA水解。;;;(2)植物细胞的破碎 ①方法：需要先用 溶解细胞膜。 ②过程：以提取洋葱的DNA为例。 在切碎的洋葱中加入一定的 ，进行充分地搅拌和 ，过滤后收集研磨液。;3.去除滤液中的杂质;4.DNA的析出 利用DNA不溶于 这一原理，可从DNA溶液中析出比较纯净的DNA，此时DNA的状态为 。 5.DNA的鉴定 将白色丝状物溶解于5 mL物质的量浓度为 中，再加入4 mL的 试剂，沸水浴加热5 min，冷却后观察溶液的颜色，同时设计不含DNA的NaCl溶液作为对照。;(二)操作提示 1.以血液为实验材料时，每100 mL血液中需要加入3 g柠檬酸钠，防止 。 2.加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，否则容易产生 ，不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧 ，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。 3.鉴定DNA用的二苯胺试剂要 ，否则会影响鉴定的效果。;;2.实验操作分析 (1)实验中应采用什么方法使鸡血细胞破裂？;(3)实验过程要充分地搅拌和研磨，如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？;规律方法;(2)三次加NaCl溶液;(3)三次过滤;(4)六次搅拌;;(1)