必威体育精装版圆红冬孢酵母(Rhodosporidium toruloides)21167菌株产油脂的研究.pdf

toruloides) 圆红冬孢酵母(Rhodosporidium 211 67菌株产油脂的研究 摘要 近些年，全球石油价格}I}上涨，石油资源紧缺状况日益凸显，国际消息称， 全球石油储量只够用40年，因此，可再生能源资源的开发与利用成为必然。生 物柴油是以动植物油脂为原料与甲醇(乙醇)经过酯交换反应制得的长链脂肪酸 酯，安全无毒、燃烧性好、可再生，可咀作为石化燃料的替代品。在适宜条件下， 某些微生物可在体内积累单细胞油脂，例如细菌、酵母和藻类等，尤其是产油脂 酵母生长速率快，油脂含量高，具有广泛的应用前景。 toruloides)中筛选得到一株油脂含量 从实验室已有的7株圆红冬孢酵母(R 较高的菌株21167。采用单因子实验对浚菌株产油脂培养基及发酵条件进行优化， 得到最佳培养基配方为(w／v)：8O％葡萄糖，522碳氨比(004％酵母粉)， 001％ 005％CaClz，0 0．1％KH2POa．0 7HzO，002％ⅢI-h)zS04，0 15％MgS04 0。 FeCb6H20，0．002％ZnS04．7H20，0．0002％MnS04HzO，培养基初始pH值为4 h。 按10％(v／v)(OD删，矿30)的接种量，在28℃,和180rpmT振荡培养120 菌株水解木薯淀粉，以木薯淀粉水解液作为碳源进行分批发酵，菌体生物量达到 220 4％(w／w)。对21167菌株产生的油脂进行脂肪酸成 g／L，油脂含量达到63 8％，说明该菌株产生的油脂主要成分为长链 分分析，Cmo和c㈨l总含量达到83 脂肪酸，可以作为合成生物柴油的原料。 实验室获得了一株能产生高活力淀粉酶的扣囊复膜酵母(S．fibul啦ra)突变 菌株All-c，具有同时水解洳1，4和Ⅱ一1，6．糖昔键的能力，非常适合水解木薯淀粉 (术薯淀粉由直链淀粉和支链淀粉组成)。为了实现木薯淀粉边水解边利用生 产油脂，采用细胞固定化技术，将菌株A1l—c细胞进行固定，并与游离的圆红冬 孢酵母细胞混合培养。Al1-c细胞将术薯淀粉水解转化为单糖，供圆红冬孢酵母 0％ 细胞生产油脂。经止交实验分析，获得AlI—c细胞壤佳固定化条件(w／v)：6 h。固定化细 聚乙烯酵，25％海藻酸钠．3O％氯化钙，pH值为8．0，4℃固定8 3U／mL。经发酵罐120h联合培养之后，圆组冬 胞最高淀粉酶活力可以达到325 十目#^#m±{**i 1 9％(w／w)。 孢酵母苗体生物量选N20 g／L，油脂含量达itl54 将L述实验获得的油脂与甲醇在NaOH催化剂作用下进行酯交换反应制各 生物柴油。反应的工艺参数为：催化剂用量为油脂质量的10％，醇油库尔比为 0 6：1，在65℃下搅拌，反应1h．经三次酯交换反应，得到可以在空气中充分燃 烧的生物柴油。 关键