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人体解剖学与组织胚胎学专业优秀论文 食源性肥胖对大鼠免疫功能的影响 关键词：食源性肥胖 免疫功能 T淋巴细胞 Lepatin受体 摘要：目的： 1 建立食源性肥胖（diet induced obesity．DIO）SD大鼠模型，观察肥胖大鼠与非肥胖大鼠脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞含量的变化，探究肥胖对大鼠细胞免疫功能的影响。 2 观察大鼠脾脏淋巴细胞表面是否存在长型的leptin受体（Ob-Rb）蛋白以及淋巴细胞内是否存在磷酸化的STAT3蛋白。 3 观察肥胖大鼠与非肥胖大鼠脾脏淋巴细胞Ob-Rb-STAT3信号转导通路活性的差异，从而探究肥胖状态下机体免疫功能的变化是否由leptin通过Ob-Rb-STAT3信号转导通路作用引起。 方法： 1 利用高能量高脂肪饮食喂养大鼠14周后，将其与用普通饲料喂养的大鼠的体重进行比较，根据体重分为DIO组以及肥胖抵抗（diet resistant，DR）组。 2 分别取对照组、DR组和DIO组大鼠的脾脏，将其制成脾细胞的单细胞悬液，再利用流式细胞术检测大鼠脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞在脾细胞中所占的百分比。 3 分别提取对照组、DR组和DIO组大鼠脾细胞的蛋白，利用Western blot检测大鼠淋巴细胞表面的Ob-Rb蛋白以及淋巴细胞内磷酸化的STAT3蛋白的表达强度。 结果： 1 体重变化的结果：普通饲料喂养的对照组大鼠与高能量高脂肪饲料喂养的大鼠的初始平均体重相当，无显著性差异（Pamp;gt;0．05）。经过14周不同饲料的喂养之后，高能饲料组大鼠的平均体重是对照组大鼠平均体重的122．1％，具有显著性差异（Pamp;lt;0．001）。在高能饲料组中，10只体重最高的大鼠设为DIO组，体重最低的10只大鼠设为DR组，DIO组大鼠的平均体重是DR组大鼠的136．7％，具有显著性差异（Pamp;lt;0．001）。 2 三组大鼠脾细胞中CD4+和CD8+T淋巴细胞含量比较的结果：通过流式细胞术的检测发现与对照组和DR组相比较，DIO组大鼠脾细胞中CD4+T淋巴细胞所占百分比变化并不明显，没有统计学差异（Pamp;gt;0．05）。与对照组和DR组相比较，DIO组大鼠脾细胞中CD8+T淋巴细胞所占百分比增加（Pamp;lt;0．001）。上述CD4+和CD8+T淋巴细胞含量的变化导致。DIO组大鼠脾脏CD4+/CD8+细胞比值低于DR组大鼠（Pamp;lt;0．01）以及对照组大鼠（Pamp;lt;0．001）。 3 三组大鼠脾脏淋巴细胞Ob-Rb蛋白以及磷酸化的STAT3蛋白表达强度的比较：通过Western blot检测发现在各组大鼠脾脏淋巴细胞所提取的蛋白中，128-kDa以及82-kDa处可见明显蛋白表达条带，与预期分子量一致，表明Ob-Rb蛋白以及705位酪氨酸磷酸化的STAT3蛋白在大鼠脾脏淋巴细胞中都有不同程度的表达。利用UVP凝胶成像系统分析后，DIO组、DR组以及对照组的大鼠脾脏淋巴细胞表面Ob-Rb蛋白以及细胞内705位酪氨酸磷酸化的STAT3蛋白表达的密度值并没有统计学的差异（Pamp;gt;0．05）。 结论： 1 经过14周高能量高脂肪的饲料喂养，SD大鼠能发展成为。DIO大鼠和DR大鼠两种体重存在明显差异动物模型，这一结果的产生是由于DIO大鼠和DR大鼠调控自身体重的方式不同所造成的。 2 流式细胞术的实验结果表明，与对照组和DR组相比较，DIO组大鼠的脾细胞中CD4+T淋巴细胞所占百分比变化并不明显，CD8+T淋巴细胞所占百分比增加，DIO组大鼠脾脏CD4+/CD8+细胞比值低于DR组以及对照组大鼠。这一实验结果表明，肥胖使大鼠处于免疫抑制状态，其细胞免疫功能降低，对感染的抵抗力下降，肥胖大鼠的易感性相应的增加。 3 Western blot的实验结果表明，Ob-Rb蛋白以及磷酸化的STAT3蛋白在大鼠脾脏淋巴细胞中都有不同程度的表达。DIO组、DR组以及对照组大鼠脾脏淋巴细胞表面的Ob-Rb蛋白以及细胞内磷酸化的STAT3蛋白表达的强度并没有明显的差异。这一实验结果说明，DIO大鼠细胞免疫功能的下降与其脾脏淋巴细胞中的Ob-Rb-STAT3信号转导通路并没有直接的关系。 正文内容 目的： 1 建立食源性肥胖（diet induced obesity．DIO）SD大鼠模型，观察肥胖大鼠与非肥胖大鼠脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞含量的变化，探究肥胖对大鼠细胞免疫功能的影响。 2 观察大鼠脾脏淋巴细胞表面是否存在长型的leptin受体（Ob-Rb）蛋白以及淋巴细胞内是否存在磷酸化的STAT3蛋白。 3 观察肥胖大鼠与非肥胖大鼠脾脏淋巴细胞Ob-Rb-STAT3信号转