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全自动还原糖测定仪使用说明书全自动还原糖测定仪使用说明书山东
全自动还原糖测定仪 使用说明书 山东省科学院生物中心(生物研究所) 山东省生物传感器重点实验室 一、基本原理 全自动还原糖测定仪(SGD-Ⅲ型)是根据费林试剂测定原理设计而成的,其原理与目前国家标准一致;费林试剂是一种氧化剂,由甲、乙液组成。测定时一定量的甲乙液混合,首先形成氢氧化铜,然后形成酒石酸钾铜络合物。次甲基蓝作为滴定终点指示剂,在氧化溶液中呈蓝色,被还原后呈无色。用标准还原糖滴定时,还原糖首先使铜还原,至铜被还原完毕,才使次甲基蓝还原成无色,即为滴定终点。 在滴定过程中,溶液颜色逐渐变化:蓝色→深蓝色→浅蓝色→紫红色→淡紫红色→在终点时突然变化至无色透明。 采用光电转换装置,检测滴定过程中透光率的变化;根据电压变化曲线由仪器控制系统自动记录、采样、确定滴定终点;根据达到滴定终点时消耗的标准还原糖量,由控制系统自动计算出样品中还原糖含量,并显示和打印结果。滴定过程电信号变化及控制原理(见图一)如下: 图一 全自动还原糖测定仪控制原理图 二、仪器结构 仪器由反应系统、自动控制系统和机壳三部分组成。: 1、反应系统 核心部件为反应池,其剖面结构如图二所示。 图二 全自动还原糖测定仪反应池结构图 反应系统由滴定池主体构成;滴定池左右两侧有入射光源和光电转换器,滴定池前后两侧有液体进出管道,滴定池内侧有温度传感器和液体加热电极,根据需要调整液体温度;滴定池底部有电磁搅拌器,使滴定液体均匀混合;上部是进样口,可用移液器将被测样品注入滴定池。 2、自动控制系统 包括电源电路、控制电路、控制面板、微型打印机;按设定程序控制滴定池液体的进出、液体温度、搅拌、光电反应信息的收集和转换、计算、测定结果显示及打印。注射泵自动加入标准液、滴定液、两个蠕动泵可自动完成清洗和排空。全自动还原糖测定仪泵系统如图三所示。 图三 全自动还原糖测定仪泵系统结构图 泵管连接: (1)清洗泵左端口接蒸馏水瓶。 (2)排空泵右端口接废液瓶。 (3)试剂泵端入口分别接甲乙液试剂瓶。 (4)滴定泵端入口接滴定糖瓶。 三、试剂配制 1、试剂名称: (1)硫酸铜(CuSO4?5H2O) (2)氢氧化钠(NaOH) (3)酒石酸钾钠(C4H4O6KNa?4H2O) (4)亚铁氰化钾(K4F4(CN)6?3H2O) (5)无水葡萄糖(C6H12O6) (6)次甲基蓝 (7)蒸馏水 (8)盐酸 2、试剂准备 无水葡萄糖(C6H12O6)烘干:103℃烘3小时,常温后放干燥器储存备用。 3、试剂配制: (1)次甲基蓝容液(1.0%): 精确称量次甲基蓝10.0g,蒸馏水完全溶解后定容至1000mL,放置于棕色瓶中备用。 (2)1.0%葡萄糖溶液(定标糖): 精确称量烘干无水葡萄糖10.0g,蒸馏水溶解后加入5mL盐酸,定容至1000mL,放冰箱中备用。 (3)滴定糖溶液(0.4 %): 精确称量烘干无水葡萄糖4.0g,蒸馏水溶解后加入5.0mL盐酸,定容至1000mL,放冰箱中备用。 (4)甲液: 精确称量11.74g硫酸铜(CuSO4?5H2O),溶解后加入7.0mL次甲基蓝容液(1.0%),定容至1000mL。 (5)乙液: 精确称量4.7g亚铁氰化钾(K4F4(CN)6?3H2O), 63.2g氢氧化钠(NaOH),58.5g酒石酸钾钠(C4H4O6KNa?4H2O)依次溶解后定容至1000mL。 (6) 根据待测液浓度范围,可选定费林甲乙液的稀释比例。 四、面板 控制面板如图四所示。 图三 全自动还原糖测定仪控制面板示意图 模式键: 待机状态下,按【模式】键定标T2。 功能键: 开机(接通电源)后,每按一次【功能】键屏幕显示以下参数: F0:排空泵(1)(默认值为25秒),设定排空泵转动时间。 F1:排空泵(1)+ 清洗泵(2)(默认值为4秒),设定排空泵、清洗泵转动时间 。 F2:清洗泵(2)(默认值为7秒),设定清洗泵转动时间。 F3:试剂泵(3)(默认值为6秒),设定试剂泵转动时间,即控制费林试剂进样量。 F4:试剂泵复位时间(默认值为8秒)。 F5:泵预推时间(默认值为8秒)。 F6:滴定泵复位时间(默认值为9秒)。 F7:时钟(暂时不用)。 F8:G1值(默认值为0),测定样品的线形范围。 F9:G2值(默认值为10),测定样品的线形范围 FA:采样电压,根据不同的样品选择(默认值为3)。 FB:连续测定次数(默认值为10次)。 以上参数可根据具体用户的需求设定,如设定某项,在其显示状态下输入数值(**.0)并按下输入键,即完成设定,但每次开机均需重复同样的设置。 打印键:按键一次取消打印功能,再按一次恢复打印功能 清洗键:正在进行滴定(反应)时,按下此键,即可终止当前反应,进入排空清洗,完成后自动进入下
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