药代动力-葛根素.docVIP

葛根素药代动力学研究概述 【摘要】:中药的作用特点是多成分、多途径、多靶点，中药药代动力学的研究是中药研究的关键技术之一。葛根的主要有效成分和有效部位为葛根素及葛根黄酮,本文从生物样品预处理、样品测定、葛根素在体内的吸收、分布、代谢排泄和药动学参数等方面，较为系统地综述了近10 年来葛根素药动学研究概况。 【关键词】:葛根素; 药代动力学 葛根素( puerarin) 为豆科植物野葛或甘葛干燥根中提取的有效成分,化学名为8-β-D-呲喃葡萄糖-4＇，7＇-二羟基异黄酮甙[1]。 葛根素主要药理作用为扩张冠状动脉和脑血管、降低心肌耗氧量、改善微循环、抗血小板聚集、降血糖、降血脂、清除氧自由基和抗脂质过氧化、促进细胞代谢等，临床广泛应用于心脑血管疾病的治疗。近年来在眼科的应用和研究的报道日益增多，主要用于降低眼内压和眼底疾病的治疗。随着葛根素在临床的应用不断拓展，其药代动力学研究也日益深入，现将近年来葛根素的药代动力学研究情况概述如下[1]。 葛根素结构式 1. 样品处理 1． 1 血浆样品处理方法药物代谢动力学样品预处理都需要沉淀去除样品中的蛋白，加入有机溶剂沉淀蛋白为常用方法，多加入甲醇、乙腈、高氯酸、三氯乙酸等，血浆和溶剂的比随不同溶剂有所不同。罗承锋等通过对比实验发现，在甲醇中加入一定量的乙腈后，其沉淀蛋白的效果更好，甲醇∶ 乙腈为9∶ 1 时，不仅可达到很好地沉淀蛋白的效果，而且葛根素的回收率最高。另外还有沸水浴法、在线固相萃取法［3］等方法。 1． 2 组织样品处理方法对于组织样品，可按1 ∶ 4 ( G/V) 加入生理盐水，匀浆后按1∶ 13． 5 ( G/ V) 加入无水甲醇，沉淀蛋白。房水和玻璃体按1∶ 1 加入0． 5mol /L 高氯酸沉淀蛋白。视网膜组织也按1∶ 1 加入0． 5mol /L 高氯酸沉淀蛋白 [3]。 2． 检测方法 目前葛根素的药代动力学研究定量方法多采用RP-HPLC法，HPLC-UV 法，HPLC-FD 法，液质联用( LCMS)法，也有采用ELISA 法和毛细电泳法。HPLCUV法灵敏度较低，不能完全满足要求; LC-MS 法集色谱的良好分离性和质谱的高选择性于一体，其分离度、分析速度、灵敏度、专属性和通用性强，但设备昂贵，不易普及，且需进行柱后修饰，检测过程复杂。HPLC-FD 法灵敏度和异性优于HPLC-UV法，但异黄酮类化合物的荧光强度对pH 有较强依赖性，酸度对葛根素的荧光强度影响很大，酸性递质对其有淬灭作用; 在弱碱性条件下，葛根素分子上的羟基发生解离，生成荧光性较强的阴离子[4]。李力等通过实验发现在pH 9． 0 时，葛根素荧光强度最大，获得的峰响应值最大，采用pH9． 0 缓冲液作为柱后修饰溶液。罗承锋等认为葛根素在合适条件下可被激发出荧光，无需进行柱后修饰或柱前衍生化，血浆的处理直接使用蛋白沉淀法，可以简化样品处理和分析方法。邹文光等采用双液相紫外检测( LC/LC-UV) 法样品中的葛根素，该方法即使不采用内标，也可以获得良好准确度与精密度。李小双等采用的自动化在线固相萃取HPLC-MS /MS法，通过自动化直接进样，保证了进样体积的准确，避免了操作条件等的变化所引起的误差，其准确度、精密度、线性范围以及稳定性均符合体内药物分析的要求[5]。内标物: 在高效液相测定中，可以不选内标物，也可选择对羟基苯甲酸［4］和大豆甙元为内标物。大豆苷元是葛根素在体内的代谢产物之一，如果生物样品中本身存在大豆苷元时，而又以后者作为内标，计算出的生物样品中葛根素的浓度将偏低。另外也有研究者选择普罗帕酮，柚皮苷为内标。 3． 体内过程 3． 1 吸收葛根素为难溶性药物，有文献报道给大鼠灌胃葛根素有大量药物自粪排出，表明葛根素在胃肠道内破坏很小，吸收程度差。正常人口服葛根素后36h 仅有0． 78% 原形药物自尿排出， 72h 自粪排出73． 8%，说明人口服吸收极少。崔升淼等研究证实葛根素在肠黏膜可以主动转运的方式吸收，其透过性受浓度影响，存在自身浓度抑制作用［6］。针对葛根素渗透性差，赖珺等筛选出对其有显著促进作用的肠吸收促进剂壳聚糖、冰片和白芷挥发油，并证实壳聚糖和白芷挥发油配伍组成复合吸收促进剂具有协同作用，且对肠黏膜无毒性。郭东艳等通过结构修饰来改善葛根素的水溶性和脂溶性，制备的葛根素衍生物与葛根素相比其水溶性降低，脂溶性增加，提高了生物利用度。陈小新等通过在Beagle 犬和大鼠体内药动学研究表明，所制备的葛根素自微乳能显著提高葛根素在Beagle犬和大鼠体内的生物利用度。以上研究提示，葛根素在胃肠道较难吸收，口服制剂因其溶解性和渗透性差导致生物利用度低下，临床应用受到限制。葛根素注射剂在临床使用过程中疗效明确，但存在严重的不良反应。因此，采用更合适的制剂学方法或者运用适