田七总皂苷的制备及其免疫活性试验.pdfVIP

动物医学进展。2012，33(1)：71—76 in Medicine Progress Veterinary 田七总皂苷的制备及其免疫活性试验 谢丽丽，胡庭俊。，潘贵珍，苏子杰 (广西大学动物科学技术学院，广西南宁 530005) 摘要：用700mL／L乙醇回流提取、大孔吸附树脂分离纯化得到田七总皂苷(PNS)．进行薄层色谱鉴 别和含量测定。为评价PNS的免疫调节作用，用环磷酰胺(CTX)为免疫抑制剂建立小鼠免疫抑制模型，分 别以4种剂量的PNS(5、25、50、75 TNF—a水平，并从组织形态上观察胸腺与脾脏的结构变化。结果表明，PNS能使小鼠胸腺和脾脏指数有所 提高，但无统计学意义(P0．05)；25 50mg／kg剂量能显著升高血清中TNF-a水平(PdO．05)；PNS处理组能不同程度地对抗模型所致小鼠胸 腺和脾脏的萎缩，增加胸腺皮质厚度和细胞数量，增加脾小结大小和淋巴细胞数量，在高剂量组尤为明显。 关键词：田七总皂苷；分离；纯化；免疫调节 中图分类号：$853．72；$852．43 文献标识码：A Chen)) 田七(Panaxnotoginseng(Burk)FH宁湘乡大药房(原产地：云南)。D101型大孔吸附树 又名三七、金不换、田七参、人参田七等[1]，属五加科 脂，天津市光复精细化工研究所生产。人参皂苷 人参属植物，主产于云南、广西及四川等地，是我国 Rgl、三七皂苷R1和人参皂苷Rbl标准品，购于中 的传统珍贵药材。田七含有皂苷、倍半萜、脂肪酸、 国药品生物制品检定所。薄层板H，青岛海洋化工 酯类、苯取代物、烷烃等多种有效成分[2]，其中皂苷 cm×10cm×5 厂生产(规格：10 cm)，批号 是田七的主要有效成分，总皂苷含量为12％[3]。田 七除了具有传统的止血补血、消肿止痛，双向调节血 糖、血脂的功效外，还有抗血栓、抗炎、抗肿瘤等作 IFN-y和TNF—aEI，ISA试剂盒，均购自南宁博仁生 用[4]，具有广阔的开发应用前景。田七主要活性成 物有限公司。 田七总皂苷(Panaxnotoginsengsaponins，PNS)1．2 方法 近年来国内外有不少研究报道田七总皂苷具有改善 1．2．1 田七总皂苷制备 心肌缺血、抗心律失常、降血脂、降血压、降血糖、抗 1．2．1．1700 mE／L乙醇回流提取 取i00 g田 纤维化、抗氧化、改善微循环、抗炎镇痛等功效作 七粉末装入圆底烧瓶中，加700mL／L乙醇 用【5。]，但其对免疫功能影响研究报道相对较少。本 1000 mL，浸泡0．5h，90℃水浴回流2h。收集滤 试验从田七中分离纯化出田七总皂苷，进行薄层色 液，再加700mL／L乙醇800mL，回流1．5h。收集 谱鉴定及含量测定，观察田七总皂苷对小鼠机体免 滤液，并将两次滤液合并。用旋转蒸发仪回收乙醇， 疫功能的影响。 将剩余的少量液体于蒸发皿挥发至膏状，然后冷冻 1材料与方法 干燥得皂苷粗提物。 1．1材料 1．2．1．2大孔树脂分离纯化 称取预处理好的 1．1．1实验动物 60只昆明系健康小鼠．雌雄各 D101型大孔树脂10g(干重)，湿法装柱，药液(浓度 6．5 mL／min流速通过树脂柱，收集流 半，平均体重为18g～22g，购自广两医科大学实验