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血清促甲状腺激素（TSH）诊断试剂盒 时间分辨免疫荧光分析法 标准操作规程 文件编号 编写者 审核者 批准者 医院 医院： 科： 室： 血清促甲状腺激素（TSH）诊断试剂盒 时间分辨免疫荧光分析法 标准操作规程 版本： 执行日期： 共3 页 第 1 页 1.原理 本试剂盒采用双抗体夹心一步法。抗人TSH单抗包被于96孔荧免板，校准品或样品中的TSH与包被单抗及铕离子(Eu3+)标记的单抗于微孔内表面发生免疫反应，通过洗涤分离微孔表面的夹心免疫复合物与游离的标记单抗。微孔表面免疫复合物中的Eu3+被荧光增强液解离后形成稳定的荧光配合物，荧光强度与校准品或样品中的TSH浓度呈正比例，通过校准曲线可得出样品中TSH浓度。 2.样本处理 使用血清或用肝素抗凝的血浆。不能使用以EDTA或柠檬酸盐作抗凝剂的血浆样本。2～8℃条件下样本可保存二周，–20℃可保存更长时间。避免样本反复冻融。 3.试剂 本科室使用苏州新波生物技术有限公司血清促甲状腺激素（TSH）时间分辨荧光免疫法诊断试剂盒，试剂盒主要组分如下： 包被有抗人TSH单抗的96孔板：一块（12孔×8） 铕（Eu3+）标记的抗TSH单抗（铕标记）：一瓶，1.5 ml 校准品（A、B、C、D、E、F ）：一套，1.5 ml/瓶 浓缩洗液：一瓶,40ml 荧光增强液：一瓶,30ml 分析缓冲液：一瓶,40ml 吸头：20支 说明书：一份 医院： 科： 室 血清促甲状腺激素（TSH）诊断试剂盒 时间分辨免疫荧光分析法 标准操作规程 版本： 执行日期： 共 3 页 第 2 页 4.仪器（用户自备） 时间分辨荧光分析仪； 微孔洗涤机； 微孔振荡器； 5.操作步骤 5.1. 试剂的准备 洗涤液：将40ml浓缩洗液和960ml蒸馏水在干净的洗液瓶中混合，作为工作洗涤液。 将分析缓冲液、校准品、待测样品和所需数量的微孔反应条平衡至室温（20～25℃）。 使用前一小时内，按照需要用量以分析缓冲液稀释铕标记（1:20）（详见操作流程图）。 5.2．吸取100μl校准品和待测样品，加入反应板微孔内。 5.3．在各微孔内加入100μl已稀释的铕标记溶液，在室温（20～25℃）下于慢档振板1小时。 5.4．洗板6次。将板条在洁净无尘的吸水纸上拍干。 5.5．在每个微孔内加入200μl增强液，于慢档振板5分钟。 5.6. 确定微孔反应板已固定在时间分辨荧光测定仪上，开始检测。 6.计算 结果测定： 用新波公司ANYTEST2000时间分辨荧光测定仪或WALLAC公司时间分辨荧光测定仪（1230、1234、1420,等）测量 7．临床意义 TSH是垂体前叶分泌的一种糖蛋白激素，分子量28000D，由αβ两个亚单位组成血清中分子TSH有生物活性。正常情况下，下丘脑分泌的TSH释放激素（TRH）和血清中的甲状腺激素分别对垂体前叶TSH的分泌起刺激和负反馈抑制作用，从而使血清TSH维持在正常水平。血清TSH从方面控甲状腺的功能：吸碘作用、甲状腺球蛋白的合成和分泌、甲状腺素的释放等。因此，整分子TSH的准确测定，是判断甲状腺和下丘脑--垂体--甲状腺轴的功能是否正常的首选指标，可鉴别诊断原发性和继发性（垂体性或下丘脑性）甲状腺功能低下、甲状腺功能亢和观察治疗效果本试剂盒操作简单、灵敏度高、特异性好可临床检测及基础医学研究。 医院： 科： 室 血清促甲状腺激素（TSH）诊断试剂盒 时间分辨荧光免疫分析法 标准操作规程 版本： 执行日期： 共 3 页 第 3 页 8．参考值 本试剂盒TSH的正常值范围为0.3 - 4.6mIU/L。