TORCH的血清学检测及IgG抗体亲和力检测对诊断的辅助作用.docVIP

TORCH的血清学检测及IgG抗体亲和力检测对诊断的辅助作用TORCH是一组病原微生物英文首字母的缩写，T代表弓形虫（toxoplasma gondii，TOX），R代表风疹病毒（rubella virus，RV），C代表巨细胞病毒（cytomegalovirus，CMV），H代表单纯疱疹病毒（herpes simplx virus，HSV）I、II型，而O代表其它微生物（others），如细小病毒B19、EB病毒、梅毒螺旋体等。 一、TORCH检测的重要性TORCH病原微生物的共同特征是，当感染发生在孕期时，可通过胎盘或产道引起宫内感染，可能导致胎儿流产、早产、宫内发育迟滞、畸形、死胎和新生儿死亡等。原发感染与复发感染相比，特别是发生在孕早期（妊娠前三个月内）的原发感染，母婴传播率更高，对胎儿造成危害的几率更大。所以对于孕妇进行产前筛查和感染监测十分重要，尤其是对原发感染、既往感染和复发感染的有效区分，能够为医生及时作出TORCH感染诊断和采取必要控制感染措施提供有力证据，有助于提高优生优育质量。 二、TORCH的血清学检测目前，国内医院对TORCH的产前筛查主要通过检测血清学特异性IgM是否为阳性来判断近期感染的发生，方法学上以ELISA应用最广泛，主流方法包括间接法和捕获法。间接法和捕获法在方法学原理上不同，因此在检测性能上存在差别，通常认为在灵敏度方面间接法较捕获法高，在特异性方面较捕获法低。捕获法对试剂盒原材料要求很高，更易受酶标板、多克隆抗体，抗原和酶联物质量的直接影响，因此好的原材料是捕获法试剂的关键。间接法会受到特异性IgG抗体和类风湿因子（RF）的影响，通常通过稀释和加入吸附剂的方法可降低干扰。表1中对这两种方法学进行了比较。由表1看出，间接法和捕获法在方法学上均可受若干干扰因素影响其特异性和灵敏度，尽管捕获法在原理上可以排除病毒特异性IgG的竞争性抑制，但RF的影响仍然存在。Champsaur等1证明，以羊抗人IgG分别对2004个血清样本进行前处理，可迅速地消除表1中各种因素对结果的干扰，既简单又高效。Ratnam等2比较4种商品化ELISA IgM间接法试剂盒与1种商品化ELISA IgM捕获法试剂盒、美国疾病控制与预防中心（Centers for disease control and prevention，CDC）研发的IgM捕获法的检测性能，结果如表2所示，某些商品化间接法试剂盒的敏感性和特异性并不亚于捕获法（包括商品化捕获法试剂盒及CDC研发的IgM捕获法），甚至优于捕获法，如间接法A和C。因此，影响试剂质量有多种因素，方法学只是其中之一，一个成熟的、质量可靠地间接法试剂也是非常优秀的。 表1 ELISA-IgM间接法与捕获法的比较 表2 麻疹病毒IgM抗体检测法相关的敏感性、特异性和预测值[2] a 除了CDC捕获法的检测样本数为200，其它检测法的检测样本数为308。b 除了CDC捕获法的检测样本数为423，其它检测法的检测样本数为454。c 数值在95％置信区间 三、TORCH的亲和力检测随着TORCH检测在我国的深入开展，亲和力检测日益受到关注。单一的TORCH特异性IgM阳性结果不能作为近期感染的判断标准。少数阳性IgM可在复发感染情况出现，另外，某些情况下IgM可持续存在（当IgM无应答或延迟应答，则可出现假阴性）。目前国内医院在孕期筛查TORCH时只是初步检测各种病原体的特异性IgM抗体，缺乏完备的TORCH检测程序和报告程序，在对结果的解释和处理上存在一定的问题。Munro等3提出的妊娠期CMV检测程序充分强调了亲和力检测的重要性并为国内专家所支持4。该检测程序以选择敏感性高的试剂为前提，孕期筛查IgM和IgG两个指标，对于IgM和IgG同时阳性者，采用IgG抗体亲和力区分原发感染和复发感染。 图1 妊娠期CMV检测程序3 机体感染病原体后，初次免疫应答后产生的抗体，通常为低亲和力（有功能的亲和力）抗体，经过数周或数月的亲和力成熟过程后，其与抗原的互补更好，而成为高亲和力抗体。因此，通过IgG抗体亲和力的测定，可排除患者前4~5个月内发生的感染，当IgM和IgG同时阳性且IgG亲和力高，孕期20周患者就需要回顾检测前3个月血液。一旦通过上述IgM、IgG和亲和力检测认为感染具有高度传染性时，最终需再进一步采取超声、羊水病毒PCR检测等决定是否终止妊娠。综上所述，特异性IgG抗体亲和力检测是该检测程序中判断孕妇病毒原发感染和复发感染的关键。 特异性IgG抗体亲和力检测在病毒原发感染和复发感染区分上的作用已被广泛接受，选择高质量IgG抗体亲和力检测试剂才能保证检测程序的准确进行及结果的恰当解释。根据Mubareka等5的结果显示，欧蒙特异性IgG抗体亲和力检测试