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湖北大学自考独立本科段论文 胚胎干细胞的研究与应用 前 言 胚胎干细胞(Embryonic stem cells ，ESCs ) 是胚胎源性多能干细胞．是从早期胚胎内 细胞团（i ercellmass，ICM)或着床后胚原始生殖细胞(Primor-dial germ ceils，PGCs ) [1] 分离和克隆出来的一种具有无限增殖能力和全向分化能力的干细胞 。这两类细胞均可分化为 [2] 包括神经细胞、造血干细胞、心肌细胞等在内的各种细胞 。ESCs 的发育全能性备受科学界的 关注，而它所具有的广泛应用价值，已经成为当今国内外生命科学研究的热点。 1 湖北大学自考独立本科段论文 胚胎干细胞的研究与应用 第一章 ESCs 研究中的相关知识 1．1 胚胎干细胞 1981年英国剑桥大学Eva s和Kaufma 首次对延迟着床的小鼠囊胚进行体外培养,首次分 离得到小鼠ESCs。此后，人们又相继用不同的方法从猪、牛、兔、羊、猴等哺乳动物分离得 到 ESCs。迟至1998年，美国威斯康辛大学的生物学家 James Thomso 及其同事才首次分离、 [3] 建成了第一个人的胚胎干细胞系 。这一成果给移植治疗、药物发现及筛选等等带来深远的影 响，打开了在体外培养更多类型的可供移植治疗的人体细胞、组织和器官的大门。 1．2 胚胎生殖细胞 (Embryonicgerm cells，EGCs) EGCs是来自于早期胎儿生殖嵴的PGCs，是早期胚胎多能干细胞中的一种，具有自我更新 和无限增殖的能力，能分化成代表三个胚层组织细胞能力的干细胞。Matsui等(1992)和Res- nick等(1992)体外长期培养小鼠PGCs，建立了小鼠PGCs系,发现在适宜条件下,其在形态上和 [4] 发育上类似于 ESCs，称为EGCst 。1998年，美国学者Shamb- lott等首先从受精后5—9周 的人胚胎生殖嵴分离，培养并建立了EGCs系。 1．3 原始生殖细胞 PGCs是生殖谱系区别于体细胞的最初形式，是哺乳动物生殖细胞的祖细胞，早在1980年 以前，Jeo 和Brinster就分别对小鼠的PGCs 的形态结构和能量代谢进行了研究；1992年， Matsui等和Resniek等以分离小 鼠胎儿的PGCs为材料,培养传代获得ESCs.从而首次较为全 [5] 面地证实PGCs 同样可以作为ESCs分离克隆的原材料 。 2 湖北大学自考独立本科段论文 胚胎干细胞的研究与应用 第二章 ESCs的来源 2.1 传统方法 从发育良好的囊胚中分离内细胞群细胞或从5-9周的胚胎生殖腺中分离胚胎干细胞。培养 条件：需要特殊的培养液、饲养细胞（人或胚鼠的成纤维细胞）、需要加入白雪病抑制因子抑 制分化。1981年美国科学家Evans和Kaufma 从小鼠胚胎分离出胚胎干细胞病成功建立，从 此开辟了哺乳动物胚胎干细胞研究的新纪元。1990年Thoms 和Gearhrt利用内细胞团和原始 生殖细胞分别建立了人的胚胎干细胞系，这一结果的宣布将胚胎干细胞的研究又解开了新的一 页！国内在胚胎干细胞方面的综合性研究起步晚（1989年），但发展迅速。在基础研究方面， 尚克刚、赖学良等已先后建立了小鼠和兔细胞系，盛慧珍研究小组在国际上首次构建了人-兔 核移植重构胚。在研究方面，著名胚胎工程专家窦忠英的