《工艺研究原始记录》.docVIP

工艺研究的试验资料 灯盏细辛的提取工艺条件筛选 一、试验方法： ⑴ 实验方法 称取灯盏细辛200g，破碎或未破碎，加入一定量的80%乙醇回流提取2次，每次一定时间。回流提取后放出药液，滤过，滤液合并，浓缩至lOOmI左右，供含量测定用。（每1ml含2g灯盏细辛ml，置250ml量瓶中，用6O%乙醇稀释至刻度，滤过，精密吸取续滤液0.2ml置10ml量瓶中，用6O%乙醇稀释至刻度，作为供试品溶液。精密称取干燥的灯盏细辛 宾对照品，置100ml容量瓶中，加6O%乙醇制成每1ml中含g的溶液，作为对照品溶液。 按照《中国药典》（2000年版一部附录Ⅴ A）分光光度法，在波长288nm波长处分别测定供试品溶液和对照品溶液的吸收度，计算样品中总黄酮的含量。 总黄酮类化合物的含量= A样×C标×V总/ A标/M。 ⑶破碎及未破碎的总黄酮含量考察 1、试验方法与结果 试验1： 称取破碎灯盏细辛200g，用80%乙醇加热回流2次，每次加入5倍量的乙醇，回流 2小时；合并提取液，滤过，滤液合并，浓缩至lOOmL左右，供含量测定用。 提取次数 开始时间 加醇量 煎 煮 开始时间 煎 煮 结束时间 浓缩过程 开始时间 浓缩过程 结束时间 第1次 8:30 5 9:10 11:10 13:35 16:20 第2次 11:50 5 12:15 标准品溶液浓度: C标= 0.101 mg/ml； 标准品吸收度（A标）: 0.3257 ； 供试品吸收度（A样）： 0.3442 含量（mg/g）： 66.719 试验2： 称取未破碎灯盏细辛200g，用80%乙醇加热回流2次，每次加入5倍量的乙醇，回流2小时，合并提取液，滤过，滤液合并，浓缩至lOOmL左右，供含量测定用。 提取次数 开始时间 加醇量 煎 煮 开始时间 煎 煮 结束时间 浓缩过程 开始时间 浓缩过程 结束时间 第1次 第2次 结果：未破碎的灯盏细辛比破碎后的灯盏细辛含量偏高，故选择未破碎的灯盏细辛种子做为研究对象。 ⑷因素水平表 水 平 因 素 加 醇 量 (A) 回流时间 (B) 醇浓度(C)% 1 3倍量，2倍量 2小时，1小时 90 2 5倍量，4倍量 1.5小时，1小时 85 3 7倍量，6倍量 1小时，0.5小时 65 表2. 正交试验方案与结果表 试验号 因 素 A B C D (空白) 实验1 1（2，1h） 1（90％） 1 实验2 2（1.5，1h） 2（85％） 2 实验3 3（1，0.5h） 3（80％） 3 实验4 1 2 3 实验5 2 3 1 实验6 3 1 2 实验7 1 3 2 实验8 2 1 3 实验9 3 2 1 二、试验过程： 1、试验方法与结果 试验1： 称取灯盏细辛200g，用90%乙醇加热回流2次，第一次加入 倍量的乙醇，回流 小时；第二次加入 倍量的乙醇，回流 小时，合并提取液，滤过，滤液合并，浓缩至lOOmL左右，供含量测定用。 提取次数 开始时间 加醇量 煎 煮 开始时间 煎 煮 结束时间 浓缩过程 开始时间 浓缩过程 结束时间 第1次 第2次 标准品溶液浓度: C标= mg/ml； 标准品吸收度（A标）: ； 供试品吸收度（A样）： 含量（mg/g）： 试验2： 称取灯盏细辛200g，用90%乙醇加热回流2次，第一次加入 倍量的乙醇，回流 小时；第二次加入 倍量的乙醇，回流 小时，合并提取液，滤过，滤液合并，浓缩至lOOmL左右，供含量测定用。 提取次数 开始时间 加醇量 煎 煮 开始时间 煎 煮 结束时间 浓缩过程 开始时间 浓缩过程 结束时间 第1次 第2次 标准品溶液浓度: C标= mg/ml； 标准品吸收度（A标）: ； 供试品吸收度（A样）： 含量（mg/g）： 试验3： 称取灯盏细辛200g，用90%乙醇加热回流2次，第一次加入 倍量的乙醇，回流 小时；第二次加入 倍量的乙醇，回流 小时，合并提取液，滤过，滤液合并，浓缩至lOOmL左右，供含量测定用。 提取次数 开始时间 加醇量 煎 煮 开始时间 煎 煮 结束时间 浓缩过程 开始时间 浓缩过程 结