《玻片标本制作技术》.pptVIP

第二章 生物玻片标本制作技术 第一节 生物玻片标本制作方法 第二节 植物材料玻片标本制作技术 第三节 动物材料玻片标本制作技术 第一节 生物玻片标本制作方法 从保存时间长短分，有临时玻片标本和永久玻片标本。从制作的方法 来分，有涂片、压片、装片(也叫整装法)、磨片和切片等 。 所使用的支持剂是石蜡，优点是切下的片子薄而匀，还能作连续切片，但制作手续较复杂 。 几个重要环节步骤如下： (1)固定 其目的在于保存组织中各细胞的形态结构和生活时相似；必须对固定液的选择、固定材料的性质、大小和固定的时间以及研究的目的等加以注意。 (2)冲洗 (3)脱水 酒精是最常用的脱水剂，把酒精配成不同梯度的浓度缓慢进行。 (4)染色 (5)浸蜡 将已透明的材料投入熔化的石蜡中，取代透明剂，使组织中空隙为石蜡透入而填满； 火棉胶切片法所使用的支持剂是火棉胶。这种方法的优点是包埋过程不经高温，可以避免组织收缩及变脆，适用精细材料(如脑)的切片，也因火棉胶有韧性，切片不致有折卷或破裂，适于大块组织及多空洞的组织(如脑、眼球)的切片 。 是一种将游离的细胞，动、植物中比较疏松的组织均匀地涂布在载玻片上的一种制片方法。涂片材料有单细胞生物、小形藻类、血液，含有细菌的培养液以及精巢、花药等 第二节 植物材料玻片标本制作技术 一、常用实验种子植物的制片方法 (一)洋葱表皮装片 (二)洋葱根尖纵切片(示细胞有丝分裂) 二、常用实验孢子植物的制片方法 (一) 衣藻装片 (二) 团藻装片 第三节 动物材料玻片标本制作技术 一、草履虫装片 二、水螅的整体装片和横切片 三、涡虫的整体装片及切片 四、蛔虫横切片 五、果蝇唾液腺染色体的制片 六、脊髓的神经细胞涂片 七、骨密质磨片 * * 一、切片法 简单、省时、容易掌握，有一定局限性，但至今在生物学教学中仍然是观察形态构造的一种基本切片方法 。 （1）材料和夹持物 （2）材料的持法 （3）持刀方法 （4）切片 （5）取片 （6）选片、装片 1.徒手切片法 切片法即用刀片将材料切成薄片的方法。 切取的标本 材料和夹持物 滴水 放置标本 加盖盖玻片 叶的横切 2.石蜡切片法 (6)切片 用石蜡包埋块包埋的石蜡块，经修整后一般使用旋转式切片机进行切片； (7)透明 透明在两种情况下进行。 第一，透明是在组织脱水后浸蜡前进行，其目的不在于为了显微镜观察，而是作为从脱水剂进入包埋剂的桥梁。因此，透明剂必须既能与酒精混合，又能与石蜡融合无间，二甲苯即具此性质，故被选为常用的透明剂。 第二，透明是在片子脱水与封藏之间进行。其目的除了作为从脱水剂进入封藏剂的桥梁外，尚有使标本透明而便于观察的作用。 (8)封藏 常用的封藏剂有树胶和甘油等。封藏的目的在于使切片能永久保存便于镜检。 3.火棉胶切片法 4.冰冻切片法 冰冻切片法是将已固定或新鲜组织块不经脱水和包埋先进行冰冻，然后在切片机上切片的一种方法。这种方法的优点是：1.制片速度快，因此常用于临床上的病理手术诊断；2.能保存组织内某些易被有机溶剂所溶解的物质，例如脂肪和酶等。 同时还可以防止组织块的收缩保持原形。缺点：所切片子较厚，又不能作连续切片还有易碎的毛病。 二、非切片法 1.涂片法 将植物或动物比较疏松的材料，如花药、根尖、水螅，蠕虫的精巢、果蝇(或其他双翅目)幼虫的唾液腺等，用较小的压力压碎在载玻片上使成一薄层的一种制片法。 ? 2.压片法 微小的生物如衣藻、水绵、青霉、变形虫和水螅等可以直接作为装片的材料植物的叶表皮、鳞茎表皮等；动物中如昆虫的翅、腿、口器等；人的口腔上皮细胞等都是从整个器官上取其一部分作为装片材料，可制作成临时或永久装片，进行观察。 3.装片法 悬滴玻片是将培养在盖玻片上溶液里的活材料(如变形虫的运动、细菌的活动、花粉的萌发等)封闭在载玻片的小室里，供观察它们活动的一种玻片标本。 4.悬滴法 一些含有矿物质的比较坚硬的动物组织要作成玻片标本时，常把材料直接放在砂石上磨成薄片，此法即为磨片法。如珊瑚的骨骼、软体动物的贝壳，脊椎动物的硬骨、角以及牙齿等都可以用此法制成玻片标本。 5.磨片法 洋葱表皮细胞 洋葱根尖细胞 南瓜茎纵切片 蚕豆幼根横切 (三)蚕豆根横切片 (四)南瓜茎纵切片及横切片 衣藻装片 团藻装片 藓原丝体装片 （三）细菌三型涂片 （四）地钱生殖托纵切片 （五）藓原丝体装片 细 菌 三 型 涂 片 草履虫接合生殖装片 水螅带芽整体装片