医学课件第一章节_血液标本采集与血涂片制备.ppt

;第一章 血液标本采集和血涂片制备; 第一节 血液标本采集和抗凝剂选择; 一、采血方法;;;部位：中指或无名指尖内侧、耳垂；半岁以下拇指或足部，特殊人员视情况而定 所用器材：采血针、吸管 采血步骤及注意事项：避免交叉应严格实行一人一针制；穿刺的深度的适当，切忌用力挤压，以免混入组织液，影响检验结果。 ;;方法学评价; 质量控制; 二、抗凝剂选择; 乙二胺四乙酸（EDTA）盐; 草酸盐 （sodium oxalate） ; 肝素（heparin） ; 枸橼酸盐（枸橼酸三钠）; 物理方法抗凝; 血液的贮存 ;冷藏保存:血浆在4℃保存24h后，某些凝血因子活性减少95%。供血细胞分析仪使用的EDTA-k2抗凝全血应保存于室温，但不宜超过8h，如果在4℃保存可使血小板计数结果减低。 冷冻保存:要长时间保存血液中有活性的成分如凝血因子、酶类等，可采取分离血清或血浆后快速深低温冷冻的方式，冷冻的标本一般应避免反复冻融。 根据检验项目要求有些血液标本要求避光、隔绝空气等 ;3. 血液标本检验后的处理 ;第二节 血液涂片制备和细胞染色 ; 一、血液涂片制备;图1-3 血涂片制备示意图（上：侧面观，下：正面观） ; [血涂片质量评价];;; 二、血液细胞染色 ;碱性染料：为阳离子染料，能接受质子，染细胞核 的染料。如亚甲蓝、天青。 酸性染料：为阴离子染料，能释放质子。主要有荧 烷-氧杂蒽染料和偶氮染料两类，能结合 细胞的碱性成分并染色，如血红蛋白、 嗜酸性颗粒成分等。 复合染料：同时具有阴、阳离子型的染料如瑞氏染料; 细胞染色原理：;b. 蛋白质的化学性质：蛋白质中的氨基酸含有不同 数量的氨基（-NH2）和羧基（-COOH），同时还有其 它活性基团。在游离状态时， -NH2获得一个H+变成 带正电的-NH3+，而-COOH失去一个H+变成带负电的-COO-。分别与不同染料结合。 c. 周围环境的酸碱度：如环境pH＜pI（ pI 为等电 点），则蛋白质带正电，结合酸性染料；反之， pH＞pI，则结合碱性染料。 ; 细胞染色法的类型; 瑞氏染色法;  [染色原理]; 图1-4 瑞氏染色原理示意图 ;[PH对细胞染色有影响] ; [试剂]; [染色方法]; 【质量控制】;;【染色结果评价】 ;姬姆萨染色法;吉姆萨染料 1.0g 甘油 66.0ml 甲醇（AR） 66.0ml [染色方法] 1. 甲醇固定干燥血膜3-5min 2. 将血膜在染液中浸染10-30min 3. 流水冲洗,待干后镜检 ; 瑞氏-吉姆萨染色 ;【试剂】;[染色方法];【质量控制】;【方法学评价】;巴氏染色法