肿瘤基因诊断与治疗.pptVIP

肿瘤的基因诊断 肿瘤是细胞的异常增生 有结构、功能和代谢的异常 具有超过正常细胞增生能力 在细胞内核酸代谢的异常: 肿瘤细胞和正常细胞的核酸代谢有显著的不同； 不同类型肿瘤细胞的核酸代谢也有较大的差异； 相同恶性程度肿瘤细胞的核酸代谢也有所不同。 癌基因的激活 抑癌基因的失活（或缺失） 原癌基因 癌基因 病毒癌基因 肿瘤抑制基因 肿瘤转移相关基因 肿瘤耐药基因等 细胞基因组中具有能够使正常细胞发生恶性转化的基因 癌基因在正常细胞的基因组中 存在 不表达状态 表达水平不足以引起细胞的恶性转化 能够抑制细胞恶性转化或抑制细胞异常 增殖的基因 目前研究较多的有p53基因、pRB基因、p16蛋白、p15蛋白、p21等。 野生型P53生物学活性 当DNA损伤的时候,P53基因就明显表达使细胞在G1期生长阻滞，促使细胞凋亡。 抑制肿瘤细胞生长 保持DNA完整性 包括肿瘤转移促进基因或肿瘤转移抑制 基因。 其表达使肿瘤细胞对药物产生耐药的基因。 血小板衍生生长因子（PDGF） 表皮生长因子（EGF） VEGF基因等 ? 可分为四大类 组织特异性基因标志 肿瘤特异性基因标志 血管生成因子 其它与肿瘤转移相关的分子及基质蛋白酶及其抑制剂 指肿瘤组织和/或起源正常组织所特有，在淋巴组织和血细胞中不存在的。如角质蛋白家族（CK）mRNA、粘蛋白基因、表皮生长因子受体（EGFR）mRNA等。 . 存在于肿瘤及其起源的正常细胞中，不存在于其他细胞。 如CEA mRNA、AFP mRNA、PSA mRNA等。 如血管内皮细胞生长因子（VEGF）等。 对于肿瘤化疗效果及预后进行推测； 还可以将肿瘤抗药基因导人骨髓细胞，特别是骨髓干细胞中，提高机体对于抗肿瘤化疗药物的耐受程度，提高抗肿瘤化疗的治疗效果。 多药抗性基因一l（MDR1），其编码的蛋白如P-糖蛋白起排流泵作用。 . 其它一些与细胞内药物代谢有关的基因也可以看作是肿瘤抗药基因，如谷胱苷肽S一转移酶（GST），可使机体解毒功能增强；癌基因 bcl-2的表达可抑制肿瘤化疗药物所诱导的肿瘤细胞程序化死亡等。 . 癌基因的突变是癌基因激活的重要方式和途径。除了见到较大范围片段的缺失或插人以及染色体转位之外，大多数情况下，都是少数核苷酸或单个碱基的突变。 . 癌基因点突变的检测 单链构象多态性（SSCP）检测技术等 . EB病毒（EBV） 人乳头瘤病毒（HPV） 乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）感染 PCR、RT-PCR Southern blot杂交技术、Northern blot杂交技术 基因芯片 基因测序。 肿瘤基因的分子诊断意义 1.肿瘤的早期诊断和筛选 2.肿瘤疗效监测 3.肿瘤的预后判断 4.肿瘤微转移检测 BCR/ABL融合基因是定位于人9q34上的C-ABL基因和22q11上的BCR基因发生t(9:22)易位，使相应无关的基因发生融合而形成，它是PH染色体的分子基础，在CML发病中起到重要作用。 Borkhardt等采用RNAi技术成功地抑制了K562白血病细胞中的BCR/ABL融合基因mRNA的表达，增加对K562白血病细胞凋亡的诱导作用，但在联合ABL酪氨酸抑制剂--Imatinib治疗时，对细胞凋亡没有相加作用。 RNAi技术的快速发展必将推动生物学和医学的大步前进。RNAi在医学领域的应用也必将为各种疾病尤其是肿瘤等疾病的根治带来希望。但是,从目前RNAi的研究现状来看,在哺乳动物中,RNAi并不能完全阻断基因的表达,尤其是异常高表达的基因,这将促使人们去探索研究新的更高效siRNA表达载体体系。为了促进基于RNAi的基因药物进入临床研究和应用,大量的研究已集中到提高siRNA分子的工业化生产能力、增加siRNA分子稳定性、开发siRNA药物的靶向传递系统等方面。尽管如此,RNAi在癌症治疗中的应用已经取得非常大的成就,因此我们有理由相信RNAi必将对癌症的最终根治起到重要的作用。 核酶用于基因治疗? 1983年美国Cech和Altmann发现并鉴定了一类具有酶催化作用的核苷酸片断，称为核酶(Ribozyme)。这一发现使酶的概念从蛋白领域扩展到核酸领域。 核酶具有核苷酸内切酶的活性，它能在无蛋白质的条件下切割靶RNA分子。 核酶用于基因治疗的条件是 ①找出肿瘤发生发展中关键性的蛋白质； ②这种蛋白的氨基酸序列（和编码基因序 列）必须是已知的，以便设计核酶的切