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三、使用中消毒剂、灭菌剂（无菌器械保存液）、透析液采样方法 1、采样时间：更换前/使用中的消毒剂、灭菌剂（无菌器械保存液）、透析液。 2、采样量及方法：在无菌条件下，用无菌吸管（一次性注射器）吸取 ﹥1ml 被检样液，应注明消毒剂名称。细菌室接种1ml并根据不同种类消毒剂加入相应的中和剂，以中和被检样液的残效作用。 * 四、紫外线强度检测方法 检测方法：开启紫外线灯 5min 后，将紫外线强度指示卡或紫外线辐照计探头置于距灯管下垂直距离1m处，照射 1min, 将感光色块变 色的结果与标准色块相比较。 * 五、消毒、灭菌内镜采样方法 1、采样时间：在消毒、灭菌后、使用前进行采样。 2、采样方法： 监测采样部位为内镜的内腔面。用无菌注射器抽取10ml 含相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活检口注入，用 15ml 无菌试管从活检出口收集，2h 内及时送检。 * 六、压力蒸汽灭菌采样及检查方法 1、化学监测法： ①化学指示胶带：将其粘贴于每一个待灭菌物品包外。 ②化学指示卡（管）：放入待灭菌的手术包（高危包）中央。 * 2、生物监测法 ① 指示菌株：为嗜热脂肪杆菌芽孢（ATCC7953或 SSIK31 株）生物指示剂。 * ② 检测方法： 将生物指示剂置于标准试验包中心部位。 预真空灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准测试包（由16全棉手术巾，每条41cm×66cm，将每条手术巾的长边先折成 3 层，短边折成 2 层然后叠放，作成23cm×23cm×15cm大小的测试包）； 下排气灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准试验包（由 3 件平纹长袖手术衣、4 块小手术巾、2 块中手术巾、1 块大手术巾，30块 10cm×10cm 8 层纱布敷料包裹成 25cm×30cm×30cm大小）； * 手提压力蒸汽灭菌器用通气贮物盒 (22cm×13cm×6cm) 代替标准试验包，盒内盛满中试管，指示剂放于中心部位，将贮物盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。 经一个灭菌周期后，将生物指示剂取出后需在室温下放10min左右，用镊子夹住指示管下端尖部，将管内安瓿夹碎送检。检测时必须设阴性对照和阳性对照。 * 3、B-D试验：预真空压力蒸汽灭菌器每天灭菌前按说明进行。 * 七、室内空气采样方法 1、采样时间：在消毒后与医疗活动前之间采样。 2、采样高度：与地面垂直高度 1.5m，距墙 1m。 3、布点方法： 室内面积≤30m2，设内、中、外对角线3 点，即中心一点，内、外点布点部位距墙壁1m处； 室内面积30m2，设 4 角及中央 5 点，4 角的布点部位距墙 1m。 * 4、采样方法：平板暴露法 将 9cm 直径普通营养琼脂平板放在室内各采样点，高度距地面1.5m，采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5min后盖好立即送检。 5、结果计算： 50000×平均菌落数 空气细菌菌落总数＝ ———————————— （cfu/m3） 平板面积（cm2）×5min * 八、物体表面采样方法 1、采样时间：消毒处理后 4h 内进行采样。 2、采样面积：被采表面100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取 100cm2。 * 3、采样方法： 用 5cm×5cm 的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子 1 支，在规格板内横、竖往返均匀涂抹各 5 次，并随之转动棉拭子，连续采样 4 个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子投入含无菌洗脱液10ml试管中并注明消毒剂名称立即送检。由细菌室加相应的中和剂。 门把手等小型不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样全部。 * 4、结果计算： 平皿上菌落的平均数×采样液稀倍数 物体表面细菌菌落总数＝ ———————————— （cfu/ cm2） 采样面积（cm2） 小型物体表面的报告结果，用 cfu/ 件表示。 * 九、医护人员手采样方法 1、采样时间：在接触病人、从事医疗活动前进行采样。 2、采样面积及方法： 被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面30cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有 10ml采样液的试管内送检。 * 3、结果计算： 平皿上菌落的平均数×采样液稀释倍数 手细菌菌落