sforanalysis药物的定量分析与分析方法的验证幻灯片.pptVIP

第二节 定量分析方法的特点 测定法 取本品约25mg，精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取此溶液2ml与内标溶液3ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱仪，记录色谱图；另取炔诺酮对照品适量，精密称定，同法测定。按内标法以峰面积计算，即得。 2.GC 第二节 定量分析方法的特点 示例 松节油的含量测定 照气相色谱法(附录Ⅵ E测定) 色谱条件与系统适用性试验 用聚乙二醇(PEG)-20M为固定相，涂布密度为20%；柱温为90°C。理论塔板数按α-蒎烯峰计算应低于1500。 校正因子测定 取正丁醇适量，精密称定，加石油醚(30～60°C)制成每1ml含20mg的溶液，作为内标溶液。另取α-蒎烯对照品约30mg，精密称定，置10ml棕色量瓶中，精密加入内标溶液2ml，加石油醚(30～60°C)至刻度，摇匀，吸取1μl注入气相色谱仪，计算校正因子。 第二节 定量分析方法的特点 测定法 取本品约35mg，精密称定，置10ml棕色量瓶中，精密加入内标溶液2ml，用石油醚(30～60°C)溶解并稀释至刻度，摇匀，吸取1μl注入气相色谱仪，测定，即得。 本品含α-蒎烯(C10H16)不得少于70%。 第三节 药品分析方法的验证 药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验指导原则 药物稳定性试验指导原则 缓释、控释制剂指导原则 微囊、微球与脂质体制剂指导原则 细菌内毒素检查法应用指导原则 目的： 证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求 效能指标： 评价分析方法的尺度 效能指标包括: 精密度, 准确度, 检测限,定量限,选择性, 线性与范围, 耐用性 第三节 药品分析方法的验证 一、准确度（accuracy） 系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度。 (一)含量测定方法 回收率(Recovery) 回收试验 加样回收试验 3×3，至少9个测定结果 第三节 药品分析方法的验证 二、精密度(Precision) 系指在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样测定所得结果之接近的程度。 表示：偏差(d)、标准偏差(s),、 相对标准偏差(RSD) 重复性: 同一实验室,同一人多次测定的精密度 中间精密度: 同一实验室，不同人，不同仪器测定的精密度 重现性: 不同实验室，不同人测定的精密度 第三节 药品分析方法的验证 三、专属性(Specificity) 指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性。 目视法 信噪比法 S/N=3 四、检测限(Limit of Detection, LOD) 药物能被检出的最低浓度(μg/ml) 五、定量限(Limit of Quantitation, LOQ) 药物能被定量测定的最低浓度(μg/ml) 信噪比法 S/N=10 第三节 药品分析方法的验证 影响因素：被测溶液的稳定性，流动相的组成和pH，商品柱的品牌，柱温等 六、线性与范围(Linearity And Range) 待测结果(响应值)与试样中被测物的浓度或量直接成正比关系的程度。 Y=a+bx （r=0.9999) 七、耐用性(Robustness) 测定条件稍有变动时，对测定结果的影响程度 第三节 药品分析方法的验证 ① ①已有重现性验证，不需验证中间精密度 ②如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充 ② ③视具体情况予以验证 ③ 第三节 药品分析方法的验证 各种含量测定方法对效能指标的要求 1. 容量分析法 用原料药精制品(含量99.5 %)或对照品考察方法的精密度，RSD ≤ 0.2 % ；回收率一般在99.7～100.3 %之间。 2. UV法 用适当浓度的精制品进行测定，其RSD≤1% 。制剂的测定，回收率一般应在98～102％之间。 3. HPLC法 要求RSD2％，回收率98～102 %之间。 第四节 生物制品分析方法的基本要求 一、常用样品的种类、采集和贮藏 (一)血样 ①血浆 (plasma) ②血清 (serum) ③全血 (二)唾液 (三)尿液 用于药物剂量回收、尿清除率、生物利用度，药物代谢物及其代谢途径、类型、速率等的研究；临床上用于判断患者是否违反医嘱用药。 第四节 生物制品分析方法的基本要求 二、生物样品分析前处理技术 全血/血浆，组织 (1)蛋白沉淀 (2)调节pH 选择性溶剂提取 RIA 残渣 化学衍生化(提取烃基化) 碱回提 酸回提 HPLC UV、FLD、ECD TLC 分光光度法