侵蚀性真菌感染.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * BALF[=bronchoalveolar lavage fluid]支气管肺泡灌洗液 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 骨髓、外周血涂片，皮肤、淋巴结活检组织涂（切）片，溃疡分泌物涂片，巨噬细胞内外直径2~3μm，有1~3个横隔的椭圆（腊肠）形细胞。糖原染色可与黑热病LD小体和荚膜组织胞浆菌鉴别。 培养阳性为诊断金标准。阳性率骨髓100%，皮损90%，血液76%。血清学试验检测Mp1基因编码的本菌特异的胞壁甘露糖蛋白Mp1P抗原或其特异抗体。 分子生物学诊断：同念珠菌属。 属丛梗孢科,引起IFI的主要是荚膜变种。 自然栖息地为富含鸟粪、蝙蝠粪的土壤。 吸入该菌感染，多见于AIDS患者。 荚膜组织胞浆菌（Histoplasma capsulatum） 荚膜组织胞浆菌（双相真菌） 外周血、骨髓涂片或组织切片,单核细胞,粒细胞内外,可见2~4μm卵圆形孢子,芽生,有荚膜,一端较尖,一端较圆。胞浆呈半月形，位于孢子的一端。确诊依靠培养。 血清学试验：尿、BALF、CSF中LA法测本菌抗原。 抗组织胞浆抗体；抗P-HPTM抗原抗体。 属于丝孢纲—丝孢目—瘤座孢科。丝状真菌，种类多，致病的16种。自然界广泛分布。 某些种与大骨节病、克山病、食管癌有关，在真菌性角膜炎中占58.7%。可致心、脑、肺感染和真菌血症。 引起的IFI逐年增多，发病率、死亡率仅次于白念珠菌和曲霉所致感染。 吸入本菌致肺感染，类似IA。侵犯血管引起血栓致组织坏死。 常见IFI病原（7）镰刀菌属（Fusarium） 特征： 典型镰刀形大分生孢子，大、小不等，有2～5个分隔。但即使多次分离出同一真菌也只能是疑诊。 确诊： 培养阳性，病理组织切片发现本菌。 GM试验 检测曲霉半乳甘露聚糖（galactomannan,GM）抗原。2003年美国FDA批准上市，2007-2008EORTC-IFICG和美国NIAID-MSG将GM列入IFI诊断标准。 试剂盒：Bio-Rad公司 PLATELIATM Aspergillus EIA. 原理： 一步酶免疫夹心微孔板法。大鼠（rat）抗曲霉GM单抗EBA-2包被，加入已处理待测血清和HRP标记EBA-2。固相上形成单抗-GM-HRP标记单抗，加酶底物呈色，测A450/620nm。 待测血清处理： 按3:1加入含EDTA处理液，沸水浴（100℃）3min，解离IC，离心沉淀除去杂蛋白。 质 控： cut off质控血清 A值0.3~0.8 阳性质控血清 A值指数（与cut off A值之比）2.0。 阴性质控血清 A值指数（与cut off A值之比）0.4。 临界值： AI（A index）：检样A值/cut off血清平均A值。 AI0.5为阴性； ≥0.5为阳性（美国FDA）。 （1）GM连续2次阳性 有临床诊断价值。 （2）GM阴性不能排除IA（GM低于可测限）；高危患者应每周2次筛查。 （3）A值0.000提示操作、试剂、仪器有误，应复测。 （4）假阴性：见于慢性肉芽肿病，Job’s综合征及某些用抗真菌药治疗的IA患者。 结果解释： （5）假阳性： ①青霉属（Penicillium）、交链孢属（Alternaria）、拟青霉属（Percilomyces）、地丝菌属（Geotrichum），组织胞浆菌属（Histoplasma）真菌与EBA-2单抗有交叉反应。 ②某些谷类制品、乳脂点心中含半乳呋喃糖（galactofuranose），牛奶制品（humanized milks）含高浓度GM，常在婴儿造成GM假阳性。 ③某些批次半合成β内酰胺抗生素（piperacillin/tazobactam，amoxicillin与clavulanic acid）中含GM抗原。 （6）GM试验对中性粒细胞减少症IA患者诊断价值较高，对非中性粒细胞减少的IA诊断价值较差。 G试验： 检测真菌(念珠菌、曲霉、肺孢子菌等)壁1,3-β-D葡聚糖(glucan). 适用于念珠菌、曲霉、肺孢子菌、镰孢霉等引起的感染。 试剂盒: Glucatell (美国Cape Code公司), 2003年美国FDA批准, 美洲鲎: 界值60pg/ml。 Fungitec.G(日本Seikagaku Kogyo公司),东方鲎: 界值20pg/ml。 Goldstream(北京金山川公司): 界值20pg/ml。 G试验原理 类似检测细菌内毒素的鲎试验(limulus lysate