《生物化学》课程教学课件 第十四章 基因重组和基因工程.pdfVIP

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第14章 基因重组和基因工程 Genetic Recombination and Genetic Engineering 注:有需要PPT版格式的请下载后索取 目录 DNA克隆、测序与重组技术的历史  1973年,Stanley Cohen等人首次获得体外 重组DNA 的分子克隆  1977年,Allan Maxam和Walter Gilbert 的 化学裂解DNA测序问世  不久,Sanger 等的双脱氧测序法  20世纪90年代启动人类基因组计划(human genome project ,HGP)  重组DNA技术学(Recombinant DNA Technology) 目录 第一节 自然界DNA重组和基因转移 是经常发生的 DNA Recombination and Gene Transfer Occur Frequently in Nature 目录 DNA重组 同源重组(homologous recombination) 接合作用(conjugation) 转化作用(transformation) 转导作用(transduction) 位点特异的重组(site-specific recombination) 转座(transposition) 目录 一、同源重组是最基本的DNA重组方式  发生在同源序列间的重组称为同源重组 (homologous recombination) ,又称基本重 组 (general recombination)。是最基本的 DNA 重组方式,通过链的断裂和再连接, 在两个DNA 分子同源序列间进行单链或双 链片段的交换。  以E.coli 的同源重组为例,了解同源重组机 制的Holliday模型。 目录  Holliday模型的4个关键步骤:  两个同源染色体DNA排列整齐;  一个DNA 的一条链断裂、并与另一个DNA 对应的链连接,形成Holliday 中间体;  通过分支移动产生异源双链DNA ;  Holliday 中间体切开并修复,形成两个双链 重组体DNA ,分别为: 片段重组体(patch recombinant) 拼接重组体(splice recombinant) 目录  片段重组体 (见模型图左边产物): 切开的链与原来断裂的是同一条链,重组 体含有一段异源双链区,其两侧来自同一亲 本DNA 。  拼接重组体 (见模型图右边产物): 切开的链并非原来断裂的链,重组体异源双 链区的两侧来自不同亲本DNA 。 目录 5´ 3 ´

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