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常规切片的制作
常规切片的制作 制作一张普通常规切片需要84道工序,一般分成标本接收,诊断医师取材,技术员制作片子,诊断医师诊断,发报告等等。我现在就技术员制作片子过程简单的说一下。 在诊断医师取材完毕后,技术员就开始制作片子。 ㈠。组织的脱水,透明,浸蜡 ①脱水。组织经固定和水洗后含大量水分,水和石蜡不能混合,因此在浸蜡和包埋前,必须进行脱水。脱水是借某些溶媒置换组织内水分的过程。常用的溶剂有:酒精,丙酮,异丙醇,正丁醇等。其中酒精是最常用的脱水剂。一般从70﹪酒精开始,经80﹪,90﹪,95﹪酒精,尔后至无水酒精。脱水的时间与组织块大小有关,对于1.5㎝×1.5㎝×0.2~0.3㎝的组织块,一般脱水时间如下:70﹪酒精数分钟,80﹪,90﹪,95﹪,100﹪,100﹪酒精各2-4小时。将酒精放在恒温箱可缩短脱水时间。对于小块组织80-100﹪酒精30-45分钟即可。放置在高浓度 酒精里时间过长,可引起组织过硬。 ②透明。为使蜡块能浸入组织块,组织脱水后,必须经过一种既能与酒精相混合,又能溶解石蜡的溶剂,通过这种溶剂的媒介作用,而达到石蜡浸入组织块的目的,在这一过程中,因组织块中的水分被溶剂取代,其折射指数接近于组织组织蛋白的折光指数,使组织块变得透亮,这就是透明。用作透明剂的有二甲苯,苯,甲苯,氯仿,环乙酮,香柏油,冬青油。一般用二甲苯做为透明剂。 ③浸蜡:组织经透明后,在熔化的石蜡内浸渍的过程称浸蜡。为使石蜡充分渗入组织块中,常需经过2-3次石蜡浸渍才能完成。在第一次石蜡中加入少量二甲苯或低熔点的软蜡,尔后在浸入高溶点的硬蜡效果更好。 在脱水过程中放在酒精,二甲苯中的时间不能过长,不然组织要硬化,对于子宫内膜,扁桃体,淋巴结等特别明显 ㈡组织的包埋和包埋方法 组织块经过浸透剂浸透,用包埋剂包起的过程称包埋。不同的包埋方法有不同的要求,包埋后均可制成含组织的块,经包埋后,可使组织的硬度和韧性增加,有利于切成 薄片。包埋的方法很多,我们一般都用常规石蜡包埋法。 石蜡包埋机包埋法: 1、 打开电源总开关,让包埋机处于工作状态。 2、 调高温度,让包埋蜡温至65度左右。 3、 打开冷冻台。 4、 取出包埋模型,由脚踩踏或手控出蜡制,注入少量的石蜡后,挟入组织块,小的多块组织应放在一起,大块组织应压平,管状和皮肤组织应竖起来包埋,然后再压上包埋盒,包埋盒上再注入少量石蜡,包埋完后,将其置于冷冻台上,旁边备有一盒冷水,当冷冻台上的包埋块表面出现凝结时,迅速将它放入水中,然后取出蜡块,修削去周边的余蜡,按顺序排列好于4°C冰箱或冰格中冻起来备用。 组织包埋时的注意事项: 1、传统包埋使用的镊子、包埋框,都必须放于40°C的恒温箱内,否则在没有暖气设备的冬天,熔化的石蜡遇到冰冷的器械回马上凝固,影响包埋。 2、 传统包埋法使用的包埋框有多种,如铜和铝制品,但以铜的为优,因铜的散热较快。 3、 包埋的石蜡温度不宜过高,否则注入模型时,会四处溢流。 4、 组织块本身的蜡不能凝固,如果凝固了,应放回重新加温,使其熔化,否则会影响切片,或整块崩出,破坏组织块。 5、 包埋完后,应待蜡块完全凝固,方可放入水中,否则未凝固石蜡会被水挤走,漂浮于水面,造成包埋块蜡块的缺损。 6、 小的多块的组织应包埋在一起在一水平面上,否则切片美观度不好,深浅不一的包埋会使有的切上,有的切不上或被修削去。 * * 由于工作量大,试剂都有毒性,对人危害性较大,现在几乎所有的医院都使用自动脱水机进行处理。我们医院组织脱水处理的程序一般有12个步骤,程序和时间如下: 1. 甲醛 3h 2. 80﹪酒精1h 3. 95﹪酒精1h 4. 95﹪酒精1 h 5.无水酒精1h 6.无水酒精1h 7.正丁醇45分钟 8.二甲苯0.5h 9.二甲苯0.5h 10.石蜡1.5h 11.石蜡1h 12.石蜡至开始包埋。
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