微生物学检验埃希菌属参考.pptVIP

肠道杆菌 埃希菌属 埃希菌属 种类 　大肠埃希菌 　蟑螂埃希菌 　弗格森埃希菌 　赫尔曼埃希菌 　伤口埃希菌 形态染色 革兰阴性短杆菌，多数有周鞭毛，有荚膜或微荚膜，有菌毛，均无芽孢 培养特性 兼性厌氧 营养要求不高 圆形光滑菌落 菌落特征 　SS平板－－红色菌落 　Mac平板－－红色菌落 　EMB平板－－紫黑色有金属光泽菌落 生化反应 氧化酶试验（－） 分解葡萄糖、乳糖、麦芽糖等，（个别菌株迟分解乳糖或不分解乳糖） KIA：AA＋－ MIU：＋＋－ IMViC：＋＋－－ 抗原结构 抗原种类：O、H、K抗原 意义：表示大肠埃希菌血清型 血清型表示式：O:K:H 举例：O111:K58:H2 抵抗力 胆盐、煌绿对该菌有抑制作用 对氯霉素、链霉素、庆大霉素敏感，但易产生耐药性 临床意义 致病物质：K抗原、菌毛、内毒素、肠毒素（LT、ST） 所致疾病： 肠外感染：多为机会感染，表现为泌尿系感染（多见），胆囊炎、腹膜炎等 肠内感染：由致病大肠埃希菌引起，表现为腹泻。 微生物学检验 标本采集： 肠外感染：根据病变部位不同采集不同标本，如血液、尿液、分泌物等 肠内感染：采集新鲜粪便 检验程序 肠内感染 检验程序 肠外感染 检验方法－肠外感染 标本直接涂片镜检 分离培养：标本接种血平板和Mac 或 EMB平版，经18～24小时培养，挑取可疑菌落作进一步鉴定。血标本先增菌，再分离培养。 鉴定： 菌落涂片 生化反应 氧化酶：－（与非发酵菌鉴别） KIA：A A＋/－ － MIR：＋＋－ IMViC＋＋－－ 尿菌落计数：＞10万／ml尿液有诊断意义 检验方法－肠内感染 分离培养：粪便标本接种Mac 或 EMB平版，经18～24小时培养，挑取可疑菌落作进一步鉴定。 生化反应：KIA、MIU、IMViC符合大肠埃希菌 致病大肠埃希菌鉴定 ETEC的鉴定 生化反应符合大肠埃希菌 毒素检测 EPEC的鉴定 生化反应符合大肠埃希菌 血清学分型 先用多价诊断血清做玻片凝集试验，如凝集再用单价诊断血清确定血清型 EIEC的鉴定 生化反应特点（与志贺菌相似） 发酵葡萄糖产酸不产气 不发酵或迟分解乳糖 多数菌株动力阴性 与志贺菌的鉴别： 毒力测定：豚鼠眼结膜试验 血清学分型：O152、O124 EHEC的鉴定 生化反应符合大肠杆菌 血清学分型：有50多个型，代表为O157:H7 O157:H7不发酵山梨醇，有助于选择性分离培养 鉴定依据 在肠道选择平板上为发酵乳糖的有色菌落 在KIA上多为＋＋＋－ IMViC为＋＋－－ 尿酶试验－ 致病性大肠杆菌需作血清学鉴定或毒力测定 LT与ST的比较 致病大肠埃希菌种类 大肠埃希菌生化反应结果 与志贺菌的鉴别 肠道杆菌 志贺菌属 志贺菌属 是引起人类细菌性痢疾的病原菌 包括四群 ,共44个血清型 A群--痢疾志贺菌 B群--福氏志贺菌 C群--鲍氏志贺菌 D群--宋内志贺菌 形态染色 革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜、无鞭毛，多数菌株有菌毛 志贺菌 培养特性 兼性厌氧、营养要求不高 在肠道选择培养基上呈无色半透明S型菌落菌落 SS平板－－无色菌落 　Mac平板－－无色菌落 　EMB平板－－无色菌落 宋内志贺菌多呈扁平、R型菌落，个别菌株可迟分解乳糖 生化反应 氧化酶试验（－） 分解葡萄糖、不分解乳糖，（个别菌株迟分解乳糖或不分解乳糖） KIA：KA－－ MIU：－ ＋/－ － IMViC：－/＋ ＋ － － 除A群外，均能发酵甘露醇 抗原结构 只有O、K抗原，无H抗原 K抗原可阻断O抗原与相应抗体的凝集 根据O抗原分4群和44型 志贺菌抗原分类 抵抗力 对理化因素抵抗力弱 尤其对酸敏感 对消毒剂敏感 易产生耐药性 变异性 S-R变异 耐药性变异 毒力变异 临床意义 致病物质： ◆菌毛 ◆内毒素 ◆志贺毒素：属外毒素，由A群志贺菌产生，具有肠毒、细胞毒、神经毒作用 所致疾病：经肠道传染，引起细菌性痢疾，有3种临床类型，即急性菌痢、慢性菌痢、中毒性菌痢 免疫性： ◆主要依赖局部SIgA， ◆病后免疫力不迟久 微生物学检验 标本采集 ◆粪便或肛拭 ◆新鲜脓血便 ◆立即送检或床边接种 ◆保存于30％甘油盐水或卡-布培养基 检验程序 检验方法 将待检标本接种肠道选择平板，35℃培养18～24小时。 若标本含菌量少，可先增菌（GN增菌液）4～6小时再分离培养。 挑取无色半透明菌落，进行初步生化反应鉴定。 符合志贺菌生化反应特征可进行血清学鉴定 血清学鉴定先用志贺氏多价诊断血清作玻片凝集试验，若凝集再用A、B、C、D群诊断血清鉴定到种、型。 血清学鉴定需注