体外分析的数据处理-检验核医学精选.pptVIP

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体外分析的数据处理-检验核医学精选

体外分析的数据处理 数据处理基本步骤 数据处理是将实验测得的未知样品的直接结果换算成剂量,每次实验均需绘制标准曲线(剂量反应曲线),从中查出待测样品剂量。 1、绘图法(有人为误差) 2、数学模型拟合法 第一节 RIA、IRMA剂量反应曲线的建立 一、RIA剂量反应曲线 二、IRMA剂量反应曲线 一、RIA剂量反应曲线 反应动力学模式: *Ag+Ag+Ab (*Ag-Ab)+(Ag-Ab) 其中:Ab——限量 (*Ag+Ag)抗原决定簇 Ab结合位点 对于Ab, *Ag和Ag不可辨别,与Ab结合机 率一致 如果:固定*Ag量, Ag↑则(*Ag-Ab)↓, Ag↓则(*Ag-Ab)↑; Ag浓度与(*Ag-Ab)放射性计数呈反向关系 RIA剂量反应曲线 RIA-Kit有一组具有梯度,已知为标准浓度的Ag——标准品,以此为横坐标,以与之相对应的(*Ag-Ab)放射性计数为纵坐标,可建立反映Ag浓度与(*Ag-Ab)计数的反向变化规律曲线——RIA剂量反应曲线。 待测物的Ag浓度可根据其对应的(*Ag-Ab)计数,在曲线中查得。 常用专业名词 T(Total)管计数:每一试管投入的*Ag的 放射性计数。 B(Bound)管计数:(*Ag-Ab)的计数也 称结合计数 Bo管计数:当Ag=0浓度时的(*Ag-Ab) 计数,为最大结合计数 F(Free)计数:游离的*Ag的放射性计数, F=T-B RIA剂量反应曲线反应坐标(纵坐标)表达方式 B------(*Ag-Ab)计数 F/B或B/F 结合计数与游离计数之比 二、IRMA剂量反应曲线 反应动力学基本模式 ●-Ab(m)+Ag [●-Ab(m)·Ag]+*Ab(过量) ∥ [●-Ab(m)·Ag·*Ab]+*Ab(余) 试中:Ag——标准品或待测样品 如果 Ag↑ [●-Ab(m)·Ag·*Ab]↑,两者呈正向关系 IRMA剂量反应曲线 以Ag浓度为横坐标,其对应的[●-Ab(m)·Ag·*Ab]计数为纵坐标(反应坐标),可建立两者的正向变化规律曲线——IRMA剂量反应曲线。 待测物Ag的浓度,可根据其对应的[●-Ab(m)·Ag+*Ab]计数在曲线中查得。 B(Bound)计数:[●- Ab(m)·Ag·*Ab]放射性计数 Bmax计数:当标准品Ag的浓度为最大的点,对应的 [●- Ab(m)·Ag·*Ab]计数 IRMA剂量反应曲线纵坐标(反应坐标)表达方式 B------ [●-Ab(m)·Ag·*Ab]放射性计数 F/B或B/F(结合计数与游离计数之比) 第二节 RIA、IRMA剂量反应 曲线处理的常用模式 函数表达式 y=f(x) 模拟曲线规律 常用方法有: 1、线性内插 2、坐标变换法(直线化法) 3、多项式拟合 4、样条函数拟合 5、四、五参数logistic模型 6、单位点质量作用定律模型 一、线性内插 式中:Xa—未知样品上一点标准品浓度(已知) Xb—未知样品下一点标准品浓度(已知) ya—标准品Xa对应的反应参数(B计数 或结合率—测量数) yb—标准品Xb对应的反应参数(B计数或结合 率—测量数) y—未知样品对应的反应参数(B计数或结合 率—测量数) 优点:计算简便 缺点:误差不均匀,尤其在直线的两侧误差不对称,误差较大。 二、坐标变换法(直线化法) 常用log—logit方式 纵坐标变换y=Lny/(1-y) (y为结合率B/B0) 横坐标变换X=LnX(X—标准品Ag浓度) 数学模型:Lny/(1-y)=a+bLnX y与Lny/(1-y)的比较 y=0.5 Lny/(1-y)=0 y Lny/(1-y) y Lny/(1-y) 0.9 2.197 0.1 -2.197 0.8 1.386 0.2

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