胃泌素对人结肠癌细胞Col0320WT中13－catenin-中国药理学通报.PDFVIP

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2018-11-27 发布于天津
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胃泌素对人结肠癌细胞Col0320WT中13－catenin-中国药理学通报

Bulletin2008 ·441· 中国药理学通报ChinesePharmacologicul Apr；24(4)：441—3 胃泌素对人结肠癌细胞Col0320WT中 13-catenin／Tcf-4通路的影响曹俊1，邹晓平1，诸葛宇征1，于成功1，于红刚2 (1．南京大学医学院附属鼓楼医院消化内科，江苏南京210008；2．武汉大学人民医院消化内科，湖北武汉430060) 中国图书分类号：R329．24；R329．25；R347．921；R73-37； R 977．1 735．350．22；R 通路影响，试图进一步探讨肿瘤发生转移和恶化的文献标识码：A文章编号：1001—1978(2008)04—0441—03 机制。摘要：目的探讨胃泌素对结肠癌细胞Col0320WT中B- 1材料与方法 catenin／Tcf-4通路影响。方法10～tool·L“胃泌素分别 1．1材料结肠腺癌细胞株Col0320细胞购于武于0、1、6、12、24、48 h时间点干预Col0320WT细胞，同时先汉大学中国典型培养物保藏中心(CCTCC)。胃泌用10一tool·L“胃泌素受体拮抗剂1365，260预干预co- 3．1／GR和胃泌素受体拮抗剂素真核表达载体pCR 10320WT细胞30min，再加10一tool·L。1胃泌素干预至12 h。采用免疫共沉淀和免疫印迹检测Col0320WT中TX．100 可溶性部分(胞质部分)和不可溶部分(细胞骨架结合部分) 中B．catenin的表达及B-catenin／Tcf-4复合物的表达。免疫 1640培养基 (Invitrogen)，灭活的胎牛血清和RPMI 印迹观察c—Myc和cyclinDl的表达。结果TX一100可溶性 h 部分中B-catenin的量随着胃泌素干预时间呈递减趋势，12(Gibco)，G418(Hualvyuan 达最小；而TX一100不溶解部分却随时干预时间的呈递增趋剂盒(MBIFermentas)，TaqDNA聚合酶(Biostar，势，12h达最大。免疫共沉淀发现胃泌素干预后B—catenin／ Tc“复合物表达量明显增多。免疫印迹检测到胃泌素干预下的细胞中c—Myc和cyclinDl表达明显增加。胃泌素受体 (SantaCluz)，小鼠抗人的Tc“单克隆抗体(Up— 拮抗剂阻断后，则可阻断胃泌素引起的上述效应。结论胃 state)，抗CCK-2R(Aphton 泌素与其受体作用后使结肠癌细胞中13-catenin分布发生转移和活化13-catenin／Tcf-4通路来降低结肠癌细胞的黏附，增的山羊抗小鼠抗体(PIERCR)。加肿瘤细胞的侵袭和转移。 1．2方法 1．2．1细胞培养人结肠肿瘤细胞系Col0320细关键词：胃泌素；CCK一2R；大肠癌；13-catenin／Tcf-4通路；侵袭