肌动蛋白在AcMNPV向细胞外运输过程中作用的初步研究.PDFVIP

维普资讯 第 l9卷6期 中 国 病 毒 学 l9 (6)：632—635 2004年 11月 VⅡt0L0GICA SⅡICA November 2004 肌动蛋白在AcMNPV向细胞外运输过程中作用的初步研究 李小青1，周 蕊1，贾蕴丽 17贾 放 ，余泽华 ，陈新文2 (1．华中师范大学昆虫研究所，湖北武汉 430079：2．中国科学院武汉病毒研究所，湖北武汉 430071) FunctionofActininTransportationoftheAcMNPV from Nucleartoout sideofCell LIXiao—qing ，ZHOURui，JIAYun—li，JIAFang ，YUZe—hua ，CHEN Xin—wen f．InstituteofEntomology，CentralChinaNormalUniversity，Wuhan430079，China；2．WuhanInstituteofVirology ChineseAcademyofSciences，Wuhan430071，China) Abstract：ToinvestigatetheroleofactininAcMNPVBV transportationfrom nucleartocytoplasm，we constructedtworecombinantvirusesAcMNPV-GFPandAcMNPV-GFP—actin．inwhichtheexpression OfGFP geneand GFP—actin fusion genewasdriven bypolyhedrinpromoter．Here．wereportthe expressionpatternofGFPinSf9cellsinfectedwithAcMNPV-GFPandAcMNPV-GFP—actin．W ithin 24—72hrafterinfection．weobservedthatGFPsignalinSf9cellsinfectedwithAcMNPV-GFP—actin wasfirstconcentrated innuclera andthen gradually locatedto cytoplasm andfinallyaccumulated exclusivelyatcytoplasmicmembrane．IntheSf9cellsinfectedwithAcMNPV-GFP,however,theGFP signalwasdiffusedthroughoutcellandhtisexpressionpattern didnotchangeduringthesameperiodof observ ation．ThUS，ourresultsindicatedthatactinmightparticipateinthetransportationoftheAcM NPV BV from nuclera tocytoplasm anditsexocytosisrfom thecel1． Keyworks：Greenfluorescentprotein；Actin；AcMNPV；Recombinantvirus 摘要：本实验利用AcMNPV(Autographacalifomicamultiplenuclearpolyhedrosisvirus，AcMNPV)的bac—tO—bac系 统构建了两种重组病毒，即含 GFP—actin融合基因的重组病毒 AcMNPV-GFP．actin和含 GFP基因的重组病毒 AcMNPV-GFP。用这两种重组病毒分别感染 Sf9细胞，以AcMNPV-GFP感染的Sf9细胞为对照，用共聚焦激光 扫描显微镜观察了绿色荧光在病毒感染过程中的分布情况。由于肌动蛋白和绿色荧光蛋 白是共定位的，所