色层分析法原理.PDFVIP

第二章色層分析法原理 Principles of Chromatography 前言 色層分析法簡稱層析法 (chromatography) ，是一種物理 或物理化學分離分析方法 。根據希臘字chroma意指顏色- color ，graphy意指- writing(書寫 )- 而命名之。 從本世紀初起 ，特別是在近50年中 ，由於氣相層析法 、 高效液相層析法及薄層色層分析法的飛速發展 ，而形成一 門專門的科學 —層析學 。色層分析法已廣泛應用於各個領 域 ，成為多組分混合物的最重要的分析方法，在各學科中 有著重要作用 。 歷史上曾有兩次諾貝爾化學獎是授予層析研究工作者 的 ：1948年瑞典科學家Tiselins因電泳和吸附分析的研究 而獲獎，1952年英國的Martin和 Synge因發展了 分配層析 而獲獎；此外在1937～l972年期間有12次諾貝爾獎的研究 中 ，色層分析法都起了關鍵的作用 。 緣起 1906年俄國植物學家茨維特(Michael Tswett)分離植物 色素時首次採用。 碳酸鈣 一 、層析法的特點、分類和作用 概述 混合物最有效的分離 、分析方法。 俄國植物學家茨維特在1906年使用的裝置 ： 層析原型裝置 ，如圖 。 試樣混合物的分離過程：也就是試樣中各組 分在稱之為層析分離柱中的兩相間，不斷進行 著的分配過程 。 其中的一相固定不動 ，稱為固定相 (Stationary phase) ；另一相是攜帶試樣混合物 流過此固定相的流體 （氣體或液體），稱為流 (移)動相(mobile phase) 。 1.基本原理 後來不僅用於分離有色物質，還用於分離無色物質 ，並出 現了種類繁多的各種層析法 。許多氣體 、液體和固體樣品都 能找到合適的層析法進行分離和分析 。 目前層析法已廣泛應用於許多領域，成為十分重要的分離 分析手段。但不管屬於哪一類層析法，其共同的基本特點是 具備兩個相 ：不動的一相 ，稱一為固定相(stationary phase) ；另一相是攜帶樣品流過固定相的流動體 ，稱為流動 相(mobile phase) 。 當流動相中樣品混合物經過固定相時 ，就會與固定相發生 作用，由於各組分在性質和結構上的差異 ，與固定相相互作 用的類型、強弱也也有差異 ，因此在同一推動力的作用下 ， 不同組分在固定相滯留時間長短不同 ，從而按先後不同的次 序從固定相中流出。 只要固定相的管柱長度足夠長 ，樣品中的成分可以清楚分離 2.層析法分類 A ．按固定相的外形分類 B ．按兩相狀態分類 C ．按分離機制分類 A ．按固定相的外形分類 ★固定相裝於管柱(玻璃或金屬管)內的層析 法 ，稱為管柱層析(column chromatography) 。 管柱層析(column chromatography) ★固定相呈平板狀的層析法 ，稱為平板(面)層 平板(面)層 析(planar chromatography) ，它又可分為 ： 析(planar chromatography) ⊙薄層層析(thin layer chromatography ；TLC) 薄層層析(thin layer chromatography ；TLC) :固定相在平板上。 ⊙濾紙層析(paper chromatography):固定相在濾 濾紙層析(paper chromatography): 紙上。 1.2 層 析 分 離 法 原 理 ex.TLC ( 薄層層析法 , Thin Layer Chromatography ) B ．按兩相狀態分類 氣體為流動相的層析稱為氣相層析 （GC ），根