波尔山羊精液保存影响因素的探讨推荐.docVIP

波尔山羊精液保存影响因素的探讨陈家振 　　为了推行波尔山羊的统一供精，延长波尔山羊人工授精过程中精液的保存时间，我们在波尔波尔山羊改良过程中，在丰县梁寨镇合作种羊场进行了波尔山羊精液的高倍稀释、常温保存、冷冻技术及授精效果的系列研究，对波尔山羊精液保存若干影响因素进行了探讨，现将结果报告如下。　　1　精液的处理　　波尔山羊精液采集后，往往由于处理不当而缩短精子的保存时间。为此，我们选用5只公波尔山羊连续采精55天，采用4种不同处理方法，借以寻求延长精子保存时间的有效途径。　　　　1.1不同稀释倍数对精子存活的影响 取活力0.83，密度每毫升20.6亿，PH值6.6的精液进行1∶2、1∶10、1∶20倍稀释（稀释液为：乳糖3克、葡萄糖2克、柠檬酸三钠1克，蒸馏水100毫升，青、链霉素各10万单位），置于14-16℃的井水中保存，间隔8小时检查活力，经6次重复，结果0.3级保存时数分别为51、46、37.5小时，精子存活指数分别为45.3、35.2、17.6，以1∶2保存效果最好。　　1.2不同保存温度对精子存活的影响 取活力0.8，密度每毫升21.3亿，稀释后进行常温（14-16℃）、低温（2-5℃）、超低温（―196℃）保存，间隔8小时检查活力，经4次重复，结果14-16℃的0.3级保存时数为48小时，精子存活指数为32.3。2-5℃的0.3级保存时数为64小时，精子存活指数为55.2，说明2-5℃的保存效果较好（P0.01）。将精液按1∶3-5的比例稀释（稀释液为乳糖4.6克，葡萄糖3.1克，柠檬酸钠1.5克，蒸馏水100毫升，卵黄20毫升，甘油5毫升，青、链霉素各10万单位）在液氮中进行冷冻，解冻活率为0.50（0.43-0.55）。　　1.3不同浓度解冻液对解冻后精液存活指数的影响 在30℃的温度条件下保存解冻后活力0.5级以上的精液，结果含有1.8%、2.2%、2.9%柠檬酸钠解冻液的存活指数分别为2.8、3.6、3.2，以含有2.2%柠檬酸钠解冻液的存活指数最高。　　1.4不同含气量对精子存活的影响 用青霉素瓶20只，盛装稀释后的精液，其中10只装满作不含气保存，另10只仅装半瓶作含气保存，在14-16℃的条件下，每8小时取出一瓶检查活力，经5次重复，精子存指数分别为42.3和39.8，两者比较差异不显著（P0.05）。　　2　稀释液的筛选　　2.1　不同配方对精子存活的影响 A配方为：葡萄糖5克、柠檬酸钠0.3克、乙二安四乙酸二钠0.1克。B配方为：乳糖5克、葡萄糖3克、柠檬酸钠1.5克。以上两配方均用蒸馏水100毫升溶解，过滤、清毒后分别加入青、链霉素各10万单位。利用A、B配方按10倍稀释波尔山羊精液在14-16℃的条件下进行保存试验。结果0.3级保存时数A配方为27小时，B 配方为57小时。精子存活指数A 配方为19.6，B配方为36.3，以B 配方效果最佳（P0.01）。取A 配方液80毫升，B 配方液100毫升分别加入卵黄20毫升，甘油5毫升进行冷冻效果试验，结果A配方的解冻活率为29.73%，B 配方的解冻活率为49.7%，精子复苏率61.97%，两配方比较，差异极显著（P0.01），说明不同稀释液配方对精液的保存影响极大，对常温保存（14-16℃）和超低温保存（―196℃）的影响是一致的。　　2.2　不同PH值对精子存活的影响 将B配方稀释液的PH 值分别调整为6.2、6.4、6.6、6.8、7.2五个梯度，用混合精液为1∶10的比例稀释，在14-16℃的进行保存试验，间隔8小时检查活力，重复4次，结果0.3级的保存时数分别为47、56、57、43、21，表明稀释液PH值以6.4-6.6效果最佳。　　2.3　不同渗透压对精子存活的影响 羊的精液渗透压为△0.641℃（0.55-0.70）,我们利用乳糖葡萄糖、柠檬酸钠三种药物分别设计了冰点下降度为△0.350℃、△0.553℃、△0.609℃、△0.857℃、△0.950℃五个配方,将精液按1∶5的比例稀释,在14-16℃的条件下每8小时检查一次活力。经5次重复，平均0.3级保存时数分别为21、46、43、51、30小时，以△0.553℃-0.857℃保存效果最好，极显著地高于0.350℃和0.950℃(P0.01)两个冰点。　　3　受胎率试验　　3.1　不同稀释倍数的受胎效果 将自然发情的母羊按输入精液的稀释倍数6个组，即1∶5、1∶10、1∶20、1：30、1∶40、1∶50，结果第一情期受胎率分别为80%（36/45）、80%（36/45）、76.02%（187/246）、71.6%（58/81）、77.78%（35/45）、80%（68/85），统计分析结果，试验组各组差异不显著（P0.05）