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转录 反转录 翻译 RNA复制 RNA 复 制 分 子 生 物 学 中 心 法 则 第 三 篇 基 因 信 息 的 传 递 DNA Protein RNA 第 十 章 复 制 半 保 留 复 制 (semi-conservative replication) 第 一 节 参 与 DNA 复 制 的 酶 一 ， DNA 聚 合 酶 (DNA polymerase) (一 ) 种 类 原 核 生 物 pol I pol II pol III 真 核 生 物 pol ?? pol ?? pol ??? pol ???? (二 ) 催化的反应 1. 5 ’ 至 3 ’的聚合活性 2, 核酸外切酶活性 ( 三 ) 复制的保真性 二, 解旋 , 解链酶类 ( 一 ) 解链酶 （helicase ）：解开双链 DNA ( 需 ATP ) 。 大肠杆菌中： rep 蛋白 解链酶 II ( 二 ) DNA 拓扑异构酶 ( DNA topoisomerase ) 拓扑酶 I ：切断 DNA 双链中一股 ，使 DNA 解链， 封闭切口 。 拓扑酶 II ：无 ATP 时，作用与酶 I 同 ， ATP 供能 ， DNA 从松驰状态变为负超螺旋。 ( 三 ) 单链 DNA 结合蛋白 (Single stranded DNA binding protein) 又称 螺旋反稳定蛋白 三 , 引物酶 (primase)和引发体 四 ,DNA 连接酶 ( DNA ligase ) ： 连接一股 DNA 链 3 ’ OH 与另一 DNA 链 5’ 磷酸根 ， 生成磷酸二酯键 。这两条链必需都与同一互补链结合 。 第二节 DNA 复制过程 一 , 复制的起始 双向复制 固定的起始点 ( 真核多个 ) 复制叉 辩认起始部位 (解链酶，引物酶，其它复制因子) 解开双链 ( 解链酶 等 ) 克服下游打结现象 ( 拓扑酶 II ) 稳定, 保护单链模板 ( SSB ) 合成 RNA 引物 ( 引物酶 ) 引物 3’ OH末端加上第一个dNMP ( pol III ) 二 , 复制的延长 pol III ( 原核 ) ; pol ? 和 pol ??? ( 真核 ) 以解开的两股单链为模板 , 以 dNTP 为原料 , 按碱基配对原则 , 在 DNA 聚合酶的催化下， 从 5’ 3’方向延伸. ( 一 ) 复制的不连续性 领头链 ; 随从链 ( 冈崎片段 ) ( 二 ) 滚环复制 ( 质粒 ) 三 , 复制的终止 RNA 酶水解前方的 RNA 引物 pol I 使冈崎片段继续延长填补空隙 DNA 连接酶连接所有片段之间的小缺口 第三节 DNA 的损伤与修复 一 ，突变的分子基础 突变 ( mutation ) 自发突变 诱变 分类 ：点突变 缺失 插 入 倒位 可引起移码突变 二 ，损伤的修复 1. 光修复 ： 光修复酶 使 T T 复原 2. 切除修复： 核酸内切酶 ，外切酶 ，pol I 和 DNA 连接酶 3. 重组修复： 健康母链填补子链缺口，母链借助 pol I