使用ThermoFisherLumina荧光分光光度计测量生物发光共振能量转移.PDFVIP

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2018-06-06 发布于天津
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使用ThermoFisherLumina荧光分光光度计测量生物发光共振能量转移.PDF

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使用ThermoFisherLumina荧光分光光度计测量生物发光共振能量转移

应用文使用ThermoFisher Lumina荧光分光光度计章测量生物发光共振能量转移关键词荧光分光光度计微量池支架生物发光荧光素酶量子点生物发、、、、、光共振能量转移（） BRET 简介分子之间的能量转移大多是由辐射导致的然而当不。同荧光物质非常靠近时（），会发生共振能量 10nm 转移（）。荧光共振能量转移（）是一种典 RET FRET 型的 RET现象。如图所示在中使用强光照射以激发供体能 1 FRET ，量处于激发态的供体将一部分或全部能量转移给，受体受体被激发如果受体荧光量子产率为零则，。，发生能量转移荧光熄灭如果受体也是一种荧光发射；体则呈现出受体的荧光光照下很多荧光物质会逐，。渐失去其荧光特性这种现象被称为光漂白，。为了提高灵敏度近期生物发光共振能量转移，（）得到了广泛应用1 。BRET使用生物发光物质 BRET 图 1 ：FRET示意图代替了荧光供体由于不在需要直射光线以激发。 BRET 供体不存在放射性的能量转移所以避免了对样品，，的损害如图（ 2 ）。荧光素酶是一种萤火虫体内的生物发光酶被广泛，用于研究2 本实验中选择海肾荧光 BRET 。， Luc8 （素酶作为供体图该物质由海肾）（），（ 3 Renilla 基因突变而来如图所示的生物 reinformis）。 4 ，Luc8 荧光峰值接近480nm 。图量子点的结构左和荧光右 5 ：