第7章 基因突变和遗传重组的分子机制PPT.ppt

甲基化程度的差异 a、MutH/MutS 扫描识别错配 碱基和邻近的GATC序列 切点－－甲基化GATC中 G的5’侧 DNA helicase II, SSB, exonuclease I去除包括错 配碱基的片段 DNA polymerase III 和 DNA ligase 填充缺口 昂贵的代价用于保证DNA的准确性 （2） 修复过程 7.3.1.2 尿嘧啶-N-糖苷酶系统 ( ung system ) 修复尿嘧啶的来源：dUTP的渗入 胞嘧啶的自发脱氨氧化 A ---TAGC--- ---ATCG--- ---TAGC--- ---A CG--- U ---TAGC--- ung-ase ① G C U U ---TAGC--- ---A CG--- AP内切酶(Apurinase) ② ---TAGC--- ---ATCG--- DNApol Ligase ③ PR 471aa 7.3.2.1 光复活（photo reactivation ） ----TT---- ----AA---- ----TT---- ----AA---- ----TT---- ----AA---- ----TT---- ----AA---- 复制前、不容易出错 400 nm 蓝光、PR 酶 (photo-reactivation enzyme) 光敏裂合酶（photolyase） 可见光激活 7.3.2 DNA的损伤修复 复制前进行 不易出错 UvrA, B, C gene 内切核酸酶 （Endonucleases） 外切核酸酶 （Exonuclease） DNA pol Ligase 碱基切除修复 核苷酸切除修复 碱基切除修复 核苷酸切除修复 7.3.2.2 切除修复 A B A B C A B C A B C A B 螺旋酶 Pol? 螺旋酶 连接酶 切 补 切 封 7.3.2.3 重组修复（Recombinative—Repair） 后复制修复、E.coli的挽回系统 E.coli 存活% U.V 计量 w.t. UvrA+ RecA+ uvr a- rec a- 该系统存在的实验证据 ★ Rec-A. gene 以某种方式参与DNA损伤修复 ? Rec修复系统比切除修复系统更有效 目前知道 ? Uvr系统负责切除二聚体 ? Rec系统负责消除没有被切除的二聚体 可能造成的后果 TT TT AA AA TT TT TT TT AA AA TT TT 变性 E.coli (Rec-A, uvr-a-) D.S. DNA S.S. DNA U.V. 复制 提取 变性 复制过程越过二聚体而在相应新链上留下缺口 ★二聚体后起始 ★ 修复时期的证明 ● 与Rec-A蛋白引起的重组(strand transfer)有关 ● TT dimer未被修复，仅表现在后代群体中TT dimer浓度的稀释 ● 链的非准确转移，导致突变机率的增加 修复相关机制: E.coli k12 w.t. 500 3200 uvr-a/Rec-A 8 50 Uvr-A/rec-a 3 20 uvr-a/rec-a 0.2 1.3 存活率为对照37%的U.V.计量 Genotype (尔格/mm2) TT数量/107 bp ● 存在与重组有关的暗修复机制 ● 与Rec-A基因引起的strand transfer有关 ● TT dimer未被修复，仅表现在后代群体中TT dimer 浓度的稀释 ● 链的非准确转移，导致突变机率的增加 重组修复 (链转移修复) 复制后修复 容易出错 RecA, DNApolymerae ligase 二聚体后起始 Re