色谱基本知识入门.pptVIP

1.1色谱法的产生和发展;M.Tswett 实验的实质： CaCO3——固定相 石油醚——流动相 混合物随流动相在柱中流动，吸附 脱附 再吸附 再脱附 分离 ; 现在的色谱法是指含义更为广泛的分离方法：它是利用混合物中各组分在互不相溶的两相中分配系数的差异，当两相作相对运动时，混合物各组分在两相中反复分配达到分离，然后分别测定，是一种分离与检测相结合的方法。 ;色谱分离基本原理; 色谱法于1906年创立后一直被遗忘，直到了1931年，德籍奥地利化学家库恩（R.Kuhn）利用茨维特的方法在纤维状氧化铝和碳酸钙的吸附柱上,将过去一个世纪以来公认为单一的结晶状胡萝卜素分离成a 和b两个同分异构体，并由所取得的纯胡萝卜素确定出了其分子式。随后他还发现了八种新类胡萝卜素，并把它们制成纯品，进行了结构分析。; 1933年库恩从35000升脱脂牛奶中分离出1g核黄素（即维生素B2），制得结晶，并测定了它的结构。; 1941年，英国学者Martin和Synge设计了由40个容器组成的萃取仪器。将蛋白水解产物乙酰化氨基酸从水相萃取到有机相而使其离析出来。 分离乙酰化氨基酸混合物时采用 ; 1952年，James、Martin和Synge在惰性载体表面涂布一层薄而均匀的有机化合物液膜，并用气体作冲洗剂，成功分离脂肪酸和脂肪胺系列。 气液色谱法产生。 同时对气液色谱法的理论与实践做了精确的叙述，提出塔板理论，因而Martin和Synge获得1952年的诺贝尔化学奖。; 1956年Van Deemter 等在前人研究的基础上发展了描述色谱过程的速率理论，提出了速率理论方程。1965年Giddings总结和扩展了前人的色谱理论，为色谱的发展奠定了理论的基础。; 1957年，Golya发明了开口管毛细管柱，使气相色谱的分离能力大大提高。同年，霍姆斯等人首次把气相色谱与质谱仪连用成功，使色谱鉴定能力弱的缺点得到克服。; 20世纪60年代末，高压泵和化学键合相用于液相色谱，出现了高效液相色谱（HPLC)。 20世纪80年代初，超临界流体色谱(SFC)得到发展，在90年代得到广泛的应用。 20世纪80年代初发展起来的毛细管电泳(CZE),在90年代得到广泛的发展和应用。 ; 1.1.2 色谱分析法的现代发展 20世纪初叶：色谱法产生，基本停滞30年后复苏 40年代：有突破性发展 50年代：有广度性的发展 60年代：有普遍性和广泛性的发展 70年代：有深入的高阶段发展 80年代：有突飞猛进、全面的高层次发展 90年代后 ：基础理论研究、色谱方法应用、色谱仪器进化都日新月异。 ;色谱科学现代发展基本状况;理论研究方向的工作： 柱过程热力学和动力学参数; 多维色谱配套; 开管柱和高效液相色谱柱; 保留规律预测; 最佳色谱分离条件选择; 超临界流体色谱等. ;（2）色谱技术问题; 复杂样品衍生化技术; 高纯流出组分制备技术; 多组分样品分析方法联用技术; 色谱系统与化学反应技术; 色谱程序控制和数据处理技术; 色谱专家系统的计算机技术. ;（3）色谱仪器进展;1.2.1 按两相物理状态分类;1.2.2 按固定相的形式分类;色谱柱管：通常是由玻璃、石英或不锈钢制成的圆管。;（2）平面色谱 纸色谱： 滤纸上结合的水分或弱/非极性溶剂作固定相. 薄层色谱： 将粉末状的固定相 铺成薄层作固定相;1.2.3 按分离过程的原理分类;离子交换色谱：不同组分在离子交换剂上的亲 和力不同而分离. 分子排阻色谱：利用分子的??小不同而在多孔 物质中的选择性渗透而分离。 电色谱（电泳）：利用带电粒子在电场中的电 效应而分离.;1.2.4 按色谱动力学过程分类;顶替法(置换法) 样品从色谱柱一端加入，再将一种吸附力或溶解力比各组分均大的置换剂加入柱中，将各组分置换出来。 吸附或溶解能力:123 流出顺序： 1，1＋2，2，2＋3，3, 3＋置换剂 应用:适于族的分离;淋洗法 先把试样加入色谱柱中，再用一种对固定相的作用力比样品弱的流动相洗脱，各组分沿柱下行的速度受三个互相作用因素（组分－溶剂－固定相）的制约，每种组分都可以单独洗脱。 应用:适于分析目的 ;