高中生物实验知识点(修正版).doc

高中生物实验知识点（教学大纲要求） 普宁英才华侨中学生物组 实验一：观察DNA和RNA在细胞中的分布 一、实验原理： 1、真核细胞的DNA主要分布在细胞核内，RNA主要分布在细胞质中。 2、甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿对DNA亲和力强，使DNA显现出绿色，而吡罗红对RNA的亲和力强，使RNA呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色，可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。 3、盐酸的作用 ① 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂的跨膜运输； ② 盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离，便于DNA与染色剂的结合 二、实验材料：人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞 三、实验用具：大小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、 石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜 四、方法步骤： 1、取材 ① 滴：在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液； ② 刮：用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下； ③ 涂：将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中； ④ 烘：将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。 2、水解 ① 解：将烘干的载玻片放入装有30ml质量分数为8%的盐酸的小烧杯中，进行材料的水解； ② 保：将小烧杯放入装有30℃温水的大烧杯中保温5分钟。 3、冲洗涂片 ① 冲：用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片10秒钟； ② 吸：用吸水纸吸去载玻片上的水分。 4、染色 ① 染：用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上，染色5分钟； ② 吸：吸去多余染色剂； ③ 盖：盖上盖玻片。 5、观察 ① 低：在低倍物镜下，寻找染色均匀，色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰； ② 高：转到高倍物镜，调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。 五、考点提示： 1、取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质； 2、取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞； 3、冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗； 4、用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热，以免破裂； 5、烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却1分钟。 实验二：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 一、实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质，阐明实验原理—颜色反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合物的基本方法，学会描述实验现象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。 二、实验原理： 某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。 1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非还原糖。实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖。 2、脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。 脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或橙红色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色），胆脂素呈淡红色，脂肪酸不着色，细胞核呈蓝色。 3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。） 三、实验材料： 1、做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，易于观察。）经试验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。 2、做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3~4小时（也可用蓖麻种子）。 3、做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。 4、淀粉的鉴定：马铃薯匀浆。 四、考点提示： 1、常见还原性糖与非还原性糖有哪些？ 答：葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。 2、还原性糖植物组织取材条件？ 答：含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。 3、研磨中为何要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？ 答：加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。 4、斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何要现混现用？ 答：混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。 5、还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为？ 答：浅蓝色 棕色 砖红色。 6、花生种子切片为何要薄？ 答：只有很薄的