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L2J-配血试验概述?????交叉配血实验用于检测受血者和供血者之间的血清型是否相容，用以预防受血动物输血后发生输血反应。主测配血试验是检验受血者血清中是否有抗供血犬的红细胞抗体，如果有则不能输血。主测配血试验：受血者血浆+供血者红细胞副测配血试验是检验供血者血清中是否有抗受血犬红细胞抗体，即使有也可以忽略，因为供血者血液进入受血者体内后很快被稀释。副测配血试验：供血者血浆+受血者红细胞多数犬不存在自然产生的抗体，因此从未输过血的犬初次交叉配血试验显示相容性。曾经有受血经历的犬，在第二次输血前，即使用同一供血犬，也一定要做交叉配血试验。猫能产生自然同种抗体，所以在猫输血前必须做交叉配血试验。交叉配血试验还能鉴定猫的血型，若主测配血试验不相合，受血猫可能为B型血，供血猫为A型血。若副测配血试验不相合，受血猫可能为A型血，供血猫为B型血。如果交叉配血试验相合，则供血猫和受血猫血型相同。猫的血液最好在需要输血时，现采血现输血，不要长期贮存。步骤交叉配血试验，在 37℃下进行，以保证可能有的凝集反应得以充分显示。具体步骤如下：分别从供体和受体采血1ml，用EDTA抗凝。在离心机内离心1min（1000rpm），吸出血清至另一标记好的试管内。受体和供体的红细胞分别配制成2%红细胞混悬液：抽取0.1ml 红细胞至另一试管内，并加入0.9%NaCl 生理盐水5ml，充分混匀。清洗红细胞：将上述混悬液离心1min（1000rpm），用吸管吸除红细胞上方的生理盐水，然后再加入0.9%NaCl 生理盐水5ml，混匀后再重复上述操作。至少清洗红细胞3遍。最后配制成清洗后的2％红细胞混悬液。主侧试验：吸取受体的2滴血清和供体的2滴2％红细胞混悬液至一试管内混匀。副侧试验：吸取供体的2滴血清和受体的2滴2％红细胞混悬液至另一试管内混匀。为了便于对照，分别将自体的2滴血清和自体的2滴2％红细胞混悬液至一试管内混匀。置于37°温箱内温浴30min。检查试管内红细胞是否出现凝集反应、是否溶血。吸取一滴试管内血清红细胞混合液滴至载玻片上，在400倍显微镜下观察是否有红细胞凝集。具体步骤如下：1.分别取0.5毫升受血者和供血者的抗凝血，可用EDTA抗凝。2.对抗凝血进行离心，2000转/ｍin，离心5ｍin。3.离心后，用移液枪吸取上面血浆，放入另外试管，并标记；或直接转移入贴有主测、副测和受血者对照标签的3支1毫升离心管中，每支离心管中加对应血浆100微升。4.用磷酸盐缓冲盐水或生理盐水洗涤红细胞3遍，并制成5%的红细胞悬液。操作方法为：加入洗涤液后，用手指轻弹试管底，使红细胞和洗涤液混合，再2000转/ｍin离心5ｍin，取上清液仍掉，如此重复3次。5．向装有100微升血浆的离心管中各加入100微升对应的5%红细胞悬液，并在室温下静置15分钟。主测配血试验：100微升受血者血浆+100微升5%供血者红细胞悬液，轻轻混合。副测配血试验：100微升供血者血浆+100微升5%受血者红细胞悬液，轻轻混合。对照试验：????100微升受血者血浆+100微升5%受血者红细胞悬液，轻轻混合。6．离心后，检查上清液有无溶血。7．轻轻晃动离心管，肉眼或借助显微镜观察有无凝集。8．主测配血试验出现任何程度的溶血或凝集都表示血型不合，副测配血试验出现轻微溶血或凝集可用于紧急情况下的输血，但是必须仔细监护。9．当受血者对照试验出现凝集或溶血后，不应进行交叉输血。结果判读凝集现象：可见红细胞凝集，凝块大小可能会有差异。（见下图，100倍镜、400倍镜）??注意要使用磷酸盐缓冲盐水或生理盐水洗涤红细胞，输血时最好使用生理盐水稀释。5%葡萄糖对红细胞的伤害。简易配血法可利用盐水配血法进行检测，具体实验步骤为：分别取供血犬和受血犬的新鲜血液，用EDTA抗凝。用0.9%氯化钠溶液洗三遍红细胞，分别以1000转/分钟离心15秒，去掉上清液。将红细胞泥配成4%红细胞盐水悬液。主侧配血：向10×75毫米的试管加入两滴供血犬的4%红细胞盐水悬液和两滴受血犬的血清或血浆。次侧配血：向10×75毫米的试管加入两滴受血犬的4%红细胞盐水悬液和两滴供血犬的血清或血浆。以1000转/分钟离心1分钟。取出观察上清液有无溶血，轻轻晃动试管，观察有无凝血。三滴法配血试验简易的“三滴法”配血实验：方法为取供血犬血液1滴、受血犬血液1滴及抗凝剂1滴于载玻片上，混合后肉眼观察有无凝集，若无凝集，无凝集和溶血即可输血。