HPCE法测定泰瑞米特钠的含量及有关物质.pptVIP

HPCE法测定泰瑞米特钠的含量 研究背景 类风湿关节炎(RA)是一种常见的以关节慢性炎症为主要表现的系统性风湿病,其致残率高,严重影响患者的生活质量。 它是一个世界范围内的疾病，患病率0.3%—1.0%。此类药物在医药市场中占有很大份额。因此，开发安全有效的抗类风湿性关节炎新药很有意义。 研究背景 研究背景 泰瑞米特钠含量 测定泰瑞米特钠含量的多种分析方法，包括高效液相色谱法、非水滴定法、毛细管电泳法及紫外光谱法。 HPCE法的建立 高效毛细管电泳（high performance capillary electrophoresis，HPCE）法是以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道，依据样品中各组分之间淌度和（或）分配系数的不同而进行分离的一类新型分析方法。 HPCE的优点 1. 高灵敏度 2. 高效 3. 高速 4. 样品用量少 5. 低消耗 CE的分离模式 1.毛细管区带电泳（CZE） 2.胶束电动毛细管色谱（MECC） 3.毛细管凝胶电泳（CGE） 4.毛细管等电聚焦（ CIEF) 等， 适用于各种样品的分析。 CE的装置 毛细管电泳仪组成 基本结构：高压电源、毛细管、电解液槽、进样系统、 检测器 仪器 毛细管电泳仪：HP3DAgilent DAD检测器 石英毛细管柱（未涂层）：60cm×75μm，有效长度50cm 试药 样品：泰瑞米特钠对照品（批号：060605）、三个杂质对照品（起始原料：050401、降解物1：050101、降解物2：050201）及三批泰瑞米特钠原料药（批号：060610-1、060610-2、060526）。磷酸二氢钠、硼砂、硼酸、氢氧化钠均为分析纯；水：Milli-Q plus Ultra-Pure water system 超纯水；十二烷基硫酸钠（SDS）（Sigma生产）。 新柱处理 碱液冲洗40分钟；以后每次开机前用碱液冲洗2分钟，水冲洗3分钟，缓冲液冲洗10分钟。 两次分析之间依次用水洗2分钟,0.1 mol/L 氢氧化钠溶液洗2分钟,水洗3分钟,缓冲液洗5分钟。 所用的样品溶液、缓冲液使用前均用0.45μm微孔滤膜过滤并超生脱气。 HPCE法的建立 1.检测波长的选择：210nm， 245nm，260nm 泰瑞米特钠 降解产物1 降解产物2 起始原料 HPCE法的建立 2.缓冲液pH值的考察：5.0，6.0，6.5， 7.0，8.0 HPCE法的建立 3.运行缓冲液系统的考察： 磷酸盐体系（pH6.5） 硼砂体系（pH7.5） HPCE法的建立 4.磷酸二氢钠浓度的考察（mmol/L）： 10，20，30，50 HPCE法的建立 5.SDS浓度的考察（mmol/L）：0,5,10，20 HPCE法的建立 6.操作电压的考察（kV）：15，20， 25 7.柱温的考察（℃）：20，25 HPCE法的建立 8.内标物的选择：乙酰氨基酚，乙酰苯 胺 9.样品溶剂：水 电泳条件 进样方式：压力进样(50mbar，5.0sec) ，水为溶剂 操作电压：20kV 柱温：20℃ 检测波长：245nm 运行缓冲液：20mmol/L磷酸二氢钠+10mmol/L十二烷基硫酸钠（pH6.5） 专属性试验 泰瑞米特钠与可能存在杂质峰分离图 溶液的配制 1.内标溶液 取乙酰苯胺适量，加水溶解并稀释成每1ml中约含1mg的溶液。 2.供试品溶液 取本品，精密称定，加水溶解并稀释成每1ml中含1mg的溶液，精密量取该溶液与内标溶液各5ml，置于25ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。 3.对照溶液 取泰瑞米特钠对照品，精密称定，加水溶解并稀释成每1 ml中含1mg的溶液，作为对照溶液的储备液。精密量取该溶液与内标溶液各5ml，置于25 ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。 方法学考察 1.线性关系考察：y=7.6323x+0.0064， r=0.9999 泰瑞米特钠在浓度0.02～1.04mg/mL 范围内线性良好 方法学考察 2. 检出限与定量限的考察 样品浓度：5mg/ml 各杂质的最低检出量均小于样品测定量的0.2%(245nm)