食用菌第二章食用菌菌种生产技术1章节.pptVIP

第二章食用菌菌种生产技术 主要内容 第一节 菌种的概念 第二节 菌种生产工艺流程 第三节 菌种生产计划 第四节 培养基的种类 第五节 菌种制作常用设备 第六节 食用菌菌种分离技术 第七节 平菇母种培育技术 第八节 平菇原种培育技术 第九节 平菇栽培种培育技术 第十节 食用菌菌种保藏 第一节 食用菌菌种概念和分级 主要内容 一、菌种的概念 二、菌种的分级 一、菌种的概念 食用菌菌种就是用人工方法培养出来的供进一步繁殖用的纯菌丝体以及供菌丝体生长的培养料。一般是指双核菌丝体。 母 种 原 种 栽 培 种 第二节 菌种生产工艺流程 菌种的生产一般分三级进行，即母种、原种、栽培种，整个菌种生产的工艺流程大致如图所示： 第三节 菌种生产计划 第四节 培养基的种类 主要内容 一、概述 二、培养基类型 （一）天然培养基、合成培养基和半合成培养基 装袋机 装袋机 高压锅 手提式高压锅 高压灭菌锅 常压灭菌锅 常压灭菌 接种箱 接种箱 净化工作台 培养箱 培养架 菌种保藏 第六节 食用菌菌种分离技术 主要内容 一、概述 二、孢子分离法 三、组织分离法 四、基内菌丝分离法 五、分离菌种的纯化 二、孢子分离(有性繁殖） （4）孢子采收 孢子收集器灭菌 种菇消毒 菌褶朝下插在支架上 纱布上倒0.1%的升汞水或无菌水少许 恒温箱18℃～ 20℃培养 无菌箱 2天左右即可落下孢子 孢子由淡咖啡色转为咖啡色时，中止收集。 无菌条件下打开钟罩，将培养皿盖好。 （5）接种孢子 用接种环蘸孢子液或孢子粉涂布于平板上 2.三角瓶孢子收集法 25℃、24h现孢子粉取出分离材料 适于不具菌柄的子实体，如木耳、银耳等孢子的收集 （1)种耳 选择 木耳：出耳早、朵形端正、大而肥厚、色黑、 无病虫杂菌、八九分成熟的新鲜春耳 银耳：瓣片肥厚、朵形大、色泽洁白而透明 、生长健壮的子实体 (2)孢子采收 无菌箱内 种耳的耳片 无菌水冲洗干净无菌纱布吸干 手术剪剪取2平方厘米的一小片 吊在灭过菌的小铁丝钩上 恒温箱25℃～ 28℃培养 两头有钩的铁丝 塞紧棉塞 培养基表面有一层白色孢子印时， 无菌条件下，取出耳片和钩子， 塞好棉塞 铁丝的另一端钩住瓶口。 三角瓶内盛有1厘米厚、 灭过菌PDA培养基。 3.试管印模收集法 无菌箱内 种菇消毒 斜面试管口对准菌褶按压 组织块进入试管 塞上棉塞 斜面向上呈45度角恒温培养 菇块推进管内约3厘米 弹射孢子后，无菌条件下取出菇块，塞好棉塞 4.贴附弹射收集法 无菌箱内 种菇消毒 切取一小块耳片或菌褶 无菌接种针挑起，用溶化的琼脂或浆糊贴附 在试管斜面的正上方，菌褶对着斜面 塞上棉塞 恒温培养 弹射孢子后，无菌条件下取出菌褶或耳片，塞好棉塞 贴附弹射法 (五）孢子分离法 收集到的孢子的生理活性及发育程度不整齐 四极性的食用菌，孢子间配对的机率只有25% 孢 子 须 分 离 纯 化 孢 子分离法 难度较大 单孢分离 多孢分离 较简易 单孢分离的菌落 蘑菇、草菇等同宗结合菇类 单孢分离法 具单孢结实能力 单孢培养的菌丝，双核化后形成 的双核菌丝一般具有结实的能力 平菇、香菇等异宗结合菇类 多孢分离法 单个孢子萌发的菌丝无结实能力， 单孢菌丝只有经过交配后才能结实 概念 把采集到的许多孢子接种在同一培养基上，让它们萌发、自由交配，形成双核菌丝的方法 1.多孢分离法 常难以得到理想的菌株 （1）平板划线法 无菌条件下 接种针蘸取少量孢子悬液 平板培养基上划线 适温培养 挑取萌发早、长势旺的菌落，转接于PDA试管再进行培养 母种 （2）直接培养法 收集的孢子 直接恒温培养 挑取性状好的菌落转接培养成母种 （3）涂布法 无菌条件下 制孢子悬液 适温培养 挑取发育匀、长势好的菌落转入试管斜面培养成为母种 移液管吸取孢子悬液放入经过灭菌的试管斜面或培养皿内， 用玻璃刮刀将孢子悬液在试管斜面或培养皿表面涂布均匀。 2.单孢分离法 概念 将采集到的孢子单个分开进行培养， 让它单独萌发成菌丝而获得纯菌种的方法 意义 对于杂交育种有十分重要的意义，在人工 条件下使两个优良品系的单孢进行杂交， 从而培育出新菌株 2.单孢分离法 方法 单孢分离器 稀释法 连续稀释法 试管稀释点样法 毛细管法 原理 用无菌水降低一定体积中孢子的密度，使每一滴水中含1～2个 孢子。将水滴滴在琼脂平板上培养，发现单个菌落时转移到新 的培养基上培养，并检查有无锁状联合，以确定是否单孢菌落。然后编号培养，得到单孢分离菌株 密闭性好 要求 1. 接 种 箱 用法 清洁、放物品→ 消毒 喷雾熏蒸紫外灯 特点 简易、利移动对人体低