传染病实习报告精选.docVIP

实习报告 一、实习目的 1、通过对雏鸡接种未知的细菌和病毒，待鸡发病后进行病理剖检和细菌病毒的分离，掌握临床诊断、病理剖检和实验室试验相结合，同时掌握对一般传染病进行诊断，确定感染的细菌和病毒种类； 2、掌握传染病基本临床诊断过程和实验室诊断的基本策略和方法。 二、实习安排与流程 （一）实习安排 时间 地点 内容 2012年5月28日 逸夫楼4017 安排实习内容；分组；配制各种试剂和培养基；剖解雏鸡，观察脏器病理变化，并用病变脏器做组织触片；采集病变脏器；接种细菌至平板上分离培养；病料研磨匀浆，冻融。 2012年5月29 日 逸夫楼4017 细菌的染色镜检；细菌的纯培养；细菌的增殖培养；10%鸡红细胞制备；鸡胚接种。 2012年5月30日 逸夫楼4017 药敏试验；生化试验；照蛋，观察鸡胚存活情况。 2012年5月31日 江浦农场；逸夫楼4017 参观江浦农场；照蛋，观察鸡胚存活情况；观察生化试验结果；观察药敏试验结果。 2012年6月1日 逸夫楼4017 提取尿囊液；琼扩试验；血凝试验。 2012年6月2日 逸夫楼4017 观察琼扩实验结果；观察血凝试验结果。 2012年6月3日 逸夫楼4017 总结实习结果，撰写实习报告 （二）实习流程： 三、实习内容 上周五（5月25日）：准备试验、接种病毒、照蛋等。 上周日（5月27日）：接种细菌 周一（5月28日） 1、配制试剂： （1）生理盐水：NaCl 8.5g，加去离子水至1000ml，121℃高压15min灭菌备用。 （2）PBS缓冲液：NaCl 8g、KCl 0.2g、Na2HPO4 1.44g、KH2PO4 0.24g， 加去离子水至1000ml，121℃高压15min灭菌备用。 （3）LB固体培养基和液体培养基：胰蛋白胨10g、酵母提取物 5g、NaCl 10g、琼脂 15g，加去离子水至1000ml，121℃高压15min灭菌备用。 （4）氯化镁孔雀绿增菌液：取商品化粉末50g，1%琼脂粉，加去离子水1000ml，加热溶解，121℃高压15min灭菌备用。 （5）亚硒酸盐胱氨酸增菌液：亚硒酸盐胱氨酸粉23g，1%琼脂粉，加去离子水1000ml，混合加热至56℃，每个试管分装3ml，水浴加热至沸腾，再煮3～5min，冷藏备用。 （6）伊红美兰琼脂：取商品化粉末42g，加去离子水1000ml，按1%比例加入琼脂粉，溶解后121℃高压15min灭菌备用。待冷至50℃时，按20～25ml/块倾注无菌平板，静置至凝固，倒置备用。平板内培养基充分凝固吼，置温箱内烘干表面水分。 （7）麦康凯琼脂平板：取商品化粉末53g，加去离子水1000ml，按1%比例加入琼脂粉，溶解后121℃高压15min灭菌备用。待冷至50℃时，按20～25ml/块倾注无菌平板，静置至凝固，倒置备用。平板内培养基充分凝固吼，置温箱内烘干表面水分。 （8）SS琼脂：取商品化粉末62g，加去离子水1000ml，按1%比例加入琼脂粉，加热煮沸至完全溶解，冷却至50℃左右，摇匀，按20～25ml/块倾注无菌平板，静置至凝固，倒置备用。 （9）琼脂：8% NaCl 24g，PBS 300ml，琼脂粉 4.03g （10）3.8%枸橼酸钠溶液：取3.8g的商品化粉末，加100ml水，溶解后121℃高压15min灭菌备用。 2、雏鸡临床症状观察： 体温升高，拉稀，粪便成白色糊状，有尿酸盐沉积，羽毛粗乱，腹部羽毛被粪便污染，呆立不动，精神萎靡，眼闭不睁，喜欢打堆，呼吸较急促。 3、剖检：人工发病鸡编号为1、2，进行解剖，观察各个组织脏器的肉眼病变，做好记录，同时用部分组织器官做触片经染色确定组织器官中是否有细菌存在。 (1)剪断病鸡的颈静脉处死，然后在大腿与腹壁之间各剪一剪，将大腿向两侧用力压，直至股骨头露出，使其平衡仰卧放置。在腹壁划开皮肤，将其向两边掀开，注意肌肉有无出血或坏死。沿腹壁至胸侧两边向前剪断肋骨，然后用力将胸骨向头部掀开，暴露胸腹腔，观察肝、脾、心及心包、肺、肾等器官的病变。 结果：肝脏稍有肿大，其他器官无明显病变。 (2)用火焰消毒过的剪刀剪下约1cm3的肝片组织在洁净的载玻片上触一下。自然干燥后革兰氏染色镜检。 染色步骤：火焰固定 → 滴加草酸铵结晶紫溶液，1~2min → 水洗 → 滴加革兰氏碘液1~3min → 水洗 → 95%酒精脱色约，0.5～1min → 水洗 → 石炭酸复红（沙黄水）10~30s → 水洗 → 干燥 → 镜检。革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。 4、细菌的分离培养：对于病变明显的脏器无菌分离细菌，划线接种伊红美