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17-DNA重组技术PPT
第十七章 重组DNA技术与基因组学 ;DNA测序的基本策略;DNA测序的基本策略;双脱氧末端终止法测序原理;双脱氧末端终止法(Sanger测序法);测序技术进展同位素标记到荧光标记,平板电泳到毛细管电泳;引物标记法测序(Dye Primer);终止法测序(Dye Terminator);第二节 重组DNA技术的基本操作原理;一、重组DNA的重要的工具酶;常用的DNA限制性内切酶的专一性;连接酶连接切口;反转录酶的三种催化功能;重组DNA技术基本操作原理;目的基因的获取;基因文库(DNA library);基因文库和cDNA文库的建立;DNA克隆的载体;重组DNA转移技术;电穿孔法示意图;pBR322质粒的结构;?噬菌体感染大肠杆菌的途径;?噬菌体突变型作为克隆载体;反转录病毒的生活周期;植物冠瘿瘤;筛选克隆细胞;pBR322质粒结构;原位杂交法筛选DNA重组体图解;重组DNA表达产物的免疫学检测;Southern和Western印迹法;第三节 重组DNA技术的应用;胰岛素原的人工合成;Ti质粒为载体的植物基因工程;Southern印迹法在DNA指纹法中的应用;Southern印迹法;第四节 基因组学与蛋白质组学及研究技术简介;基因组文库提供基因组特异的遗传信息目录;多聚酶链式反应扩增特异性的DNA片段; PCR技术原理示意图;PCR技术的发展与应用;基因组测序提供最完善的基因文库;人类基因组各种顺序组成图;序列和结构相关性提供蛋白质功能的信息;蛋白质技术和核酸技术的相互增强; DNA芯片(DNA chip)技术是采用寡核苷酸原位合成或显微打印手段,将数以万计的DNA探针片段有序地固化于支持物表面上,产生二维DNA探针阵列,然后与标记的样品进行杂交,反应结果通过检测杂交信号的方法(同位素法、化学荧光法、化学发光法或酶标法)显示,再用精密的扫描仪或CCD摄象技术记录,通过计算机软件分析,综合成可读的IC总信息,来实现对生物样品的快速、并行、高效地检测或诊断。 芯片分析实际上也是传感器分析的组合。芯片阵列中的每一个单元微点都是一个传感器的探头,所以传感器技术的精髓往往都被用于芯片的发展。阵列检测可以大大提高检测???率,减少工作量,增加可比性,所以芯片技术也是传感器技术的发展。;DVA芯片工作示意图
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