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植物组织培养 宜宾职业技术学院 08.9 课程学习目的 1 、领会植物组织培养技术对社会经济发展意义,发展状况及其应用。 2 、学习植物组织培养基本原理和方法,掌握植物组织培养基本实践操作,具备无菌观念,能够熟练进行培养基制备、无菌转接、无菌接种等重要操作技能。领会激素调节和培养控制对植物组织培养的重要作用。 3 、学习愈伤组织培养、器官培养、植物脱毒等各项植物组织培养技术方法,具备熟练进行植物茎尖培养、叶培养的操作技术。 4 、养成组培苗工厂或实验室基础设计能力,通过学习组培苗工厂化生产和管理,了解成本核算和效益分析基本原则。 5 、具备查阅植物组织培养资料,收集各类植物组织培养信息的能力。提高分析问题、解决问题的能力,为学生从事生物技术相关工作奠定基础。 6 、能尝试进行某种植物组织培养方案的设计和试验。 课程学习重点 培养基制作、无菌接种、培养观察、驯化移栽等植物组织培养基本操作技术.愈伤组织培养、器官培养、植物脱毒等各类型植物组织培养原理和操作.花卉、农作物等常见经济植物的组织培养基本方法。 课程学习难点 植物组织培养原理,无菌观念的建立,高压灭菌操作,无菌接种技术,细胞培养、原生质体培养原理和方法,植物脱毒方法,常见植物组织培养的激素调控和培养方式,组培苗工厂化生产成本核算和效益分析。 绪 论 第一节 植物组织培养概述 第二节 植物组织培养概念、生理依据及特点 第三节 植物组织培养应用 生物技术范畴 基因工程 细胞工程 酶工程 发酵工程 蛋白质工程 2、细胞工程的概念、范畴 细胞工程 是应用细胞生物学和分子生物学方法,借助工程学的方法技术,在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性,获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科 广义的细胞工程包括所有的生物组织、器官及细胞离体操作和培养技术。 狭义的细胞工程则是指细胞融合和细胞培养技术 细胞工程研究范畴 动物细胞工程 细胞培养技术;细胞融合技术;胚胎工程技术;克隆技术。 植物细胞工程 植物组织、器官培养技术;细胞培养技术;原生质体融合与培养技术;亚细胞水平操作技术等。 二、植物组织培养概念、生理依据及特点 1、植物组织培养基本概念 以植物组织细胞为基本单位,在离体条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作,使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变,从而改良品种或创造新物种,或加速繁殖植物个体,或获得有用物质的过程。 2、植物组织培养生理依据 植物组织培养是以细胞全能性作为理论依据的。 植物细胞全能性是指植物体的任何一个细胞都携带有该物种的全部遗传信息,离体细胞在一定的条件下具有发育成完整植株的潜在能力。 全能性的实现受营养、生长调节物质和外界条件控制,其中植物生长调节物质对离体植物材料的生长和形态分化有重要调控作用。 3、植物组织培养特点 ①培养条件可人为控制,周年生产 ②生长周期短,繁殖率高 ③管理方便,利于工厂化生产 ④培养材料经济,来源广泛 4、植物组织培养类型 植株培养 器官培养 胚胎培养 愈伤组织培养 细胞培养 原生质体培养 一.探索阶段 细胞学说和细胞全能性学说为组织培养技术的产生奠定了理论基础,对组织培养技术的建立进行了有益的探索。 细胞学说1839年提出:有机体内一样的条件下,每个细胞都可以独立生活和发展。 细胞全能性学说于1902年提出:高等植物的组织、器官细胞都有植物个体一样的性质和能力,可以通过植物细胞培养使单个细胞发育成为一个新个体。 其二,技术体系更加完善:根据不同的培养目的外植体的取材和灭菌方法,不同外植体及其培养产物的培养程序,适合于不同植物种类和外植体类型的培养基等。 其三,已形成了以细胞全能性为基本理论基础,以细胞脱分化和再分化调控为中心的较为完整理论体系。 其四,研究目的性更加明确,广泛应用到生物科学研究的各个领域,以细胞工程为基础的新型生物技术产业正在兴起。 第三节 植物组织培养应用 一、在植物育种上的应用 -快速获得特殊倍性材料:花药和花粉培养可获单倍体,加倍后获得纯合材料,大大缩短育种周期;胚乳培养技术可获得三倍体,用于无核果实植物育种中。 -克服远缘杂交不亲和:原生质体融合技术获得亲缘关系相差很远的两亲本间的细胞杂种,不仅克服远缘杂交不亲和,而且有可能创造新品种。 -克服杂种胚早期夭折:远缘杂种胚和某些果树(柑橘、早熟桃)的胚常常早期夭折,利用幼胚培养技术可以克服。 -导入外源基因:可进行细胞器转移、基因转移、染色体转移等,实现外源基因的导入。 -突变体筛选:细胞培养

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