胶体金免疫层析法对乙肝表面抗原测定的价值分析.docVIP

精品论文 参考文献 胶体金免疫层析法对乙肝表面抗原测定的价值分析 马彧旻 (黑龙江省大庆市第四医院检验科 163712) 【中图分类号】R512.6+2 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）25-0198-02 【摘要】 目的 探讨胶体金免疫层析法(GICA)对乙肝表面抗原测定的临床价值。方法 将88份选定的住院患者标本同时以GICA和ELISA两种方法检测，操作方法均按试剂盒说明书,并且对GICA法进行灵敏性、重复型、特异性分析。结果　GICA和ELISA两种方法比较,阳性及阴性符合率均为99%以上,并且GICA试条只与HBsAg有特异性反应，与乙型肝炎病毒核心抗原、e抗原等无交叉反应。结论 胶体金免疫层析法操作简便快速，费用少，结果鲜明直观，灵敏度、重复性、特异性与ELISA相近，又不需特殊仪器设备，能满足临床急诊和基层医院的需求，其对乙肝表面抗原测定有很高的临床适用价值。 【关键词】 GICA ELISA HBsAg 我国是乙肝高发病区，乙肝病毒携带者达一亿以上，对人们的工作、学习、精神和社会交往都有严重的影响.而 HBsAg是乙肝病毒感染和诊断最敏感的指标.临床上普遍采用ELISA一步法检测HBsAg，但因耗时较长，需反复洗涤和借助酶标仪等设备，不能满足临床急诊和基层医院需要;免疫层析法操作简便，费用少，结果鲜明直观，灵敏度、特异性与ELISA相近，又不需特殊仪器设备，恰好弥补了ELISA法等其他方法所存在的不足，更适合于临床的需要。 1 材料与方法 1.1 88份标本，均来自我院住院患者。 1.2 试剂①ELISA HbsAg试剂盒（上海科华生物技术有限公司）；试剂②GICA HbsAg试验卡；1ng/ml、2ng/ml、HbsAg 5ng/ml临界值参考品。 1.3 仪器 GRIFOLS全自动酶免系统酶标仪，37℃恒温箱，振荡器。 1.4 方法 将88份标本同时以ELISA和GICA两种方法检测，操作方法均按试剂盒说明书。结果判断：胶体金免疫层析法,两条红色线为阳性，仅对照区一条红色线为阴性；强阳性标本1min内可判断结果，弱阳性及阴性结果需在15min内判断。ELISA法,反应板孔显色为阳性. 2 结果 2.1 GICA法灵敏度：用卫生部临床检验中心提供的2ng/ml、5ng/ml临界参考品均能显示阳性结果。1ng/ml及吸光度小于0.20的标本则不能显示阳性结果。 2.2 重复性：在检测88份标本时，取弱阳性、阳性、阴性各三份标本置室温下采用快速胶体金免疫层析法每天测一次，连续三天，结果一样。 胶体金免疫层析法重复性非常好。 2.3 特异性：取HBeAg、HBcAg阳性标本，均不与胶体金免疫层析法 HBsAg试验卡产生阳性反应，特异性好。 2.4 88份标本的HBsAg采用两种方法进行检测结果（见附表）。 附表 GICA法与ELISA法检测88例标本的结果 ELISA法 GICA法 阳性 阴性 合计 阳性 23 1 24 阴性 1 63 64 合计 24 64 88 从表上可以看出，两种方法同为阳性的有23例，阳性符合率为99.1%；同为阴性的有63例，阴性符合率为99.4%；两种方法结果不同的有2例，这2例标本中有2例标本GICA法阴性，而ELISA法则是弱阳性结果，但其吸光度值小于2ng/ml的吸光度值而大于1ng/ml的吸光度值。 3 讨论 GICA法是在免疫渗滤试验基础上发展起来的一项新技术[1]。该试验卡的组成分为左右两半；卡左半部分下端粉红色垫上涂有以胶体金标记的针对HBsAg的特异性单克隆抗体；当样本加在该粉红色垫上时，样本中HBsAg将与金标抗体形成复合物。右半部分下端白色纤维膜上滴加试剂后，合起卡片，HBsAg与金一抗HBs结合物在试剂作用下，通过毛细管效应沿纤维薄膜迁移，在包被有另一个单克隆抗体的试验区形成“抗HBs-HbsAg-金抗标体”夹心物而成一条红色线，对照区另有一红色带作为实验对照。阳性标本将出现两条红色线，阴性标本则只有对照区一条红色线。该试验以胶体金代替酶标记抗HBs，减少了操作步骤，可以直接观察结果[2]。GICA法从抽血到发报告10m