结核T细胞检测（TB-IGRA）.doc

重庆金域医学检验所有限公司 结核T细胞检测（TB-IGRA） 有效解决结核病实验室检测难题 重庆金域·市场部 2014-01-20  目 录 结核检测发展趋势 2 二、TB-IGRA检测原理及方法 3 三、TB-IGRA检测试剂的优势 4 四、开展TB-IGRA检测的意义 五、TB-IGRA全国使用情况摘要 10 六、重庆地区TB-IGRA项目收费标准 11 七、报告单解读及报告单模版 12 八、相关文献 13九、采样要求  结核检测发展趋势 据世界卫生组织（WHO）统计，我国是全球22个结核病高负担国家之一，在结核病防治工作还面临着诸多新的问题与挑战。近年来，我国每年报告肺结核发病人数约130万，且患者人数逐年增加，始终位居全国甲乙类传染病的前列。国家已出台相关文件要求加强结核病防治工作，要求及早发现、治疗疾病，遏制结核病流行态势的出现。而这无疑对结核的诊治水平提出了更高的要求。 但迄今为止，临床上用于结核分枝杆菌感染的诊断方法仍存在许多不足。首先，结核菌素皮肤试验（TST）BCG）作为常规接种疫苗的国家推广，同时，TST对潜伏性结核分枝杆菌感染的敏感性一般，对于免疫抑制者的检测结果亦难以确定；其次，细菌学诊断无论是涂片镜检还是细菌培养，其检出率都不超过50%，灵敏度十分有限；核酸诊断虽然灵敏度大幅提高，但该方法具有成本高、操作复杂、对实验条件及技术人员要求高、肺外结核病人取样困难等特点，因而很难得到大范围推广。 近年来，一类用于诊断结核分枝杆菌感染的新方法进入了人们的视线——结核感染T细胞检测（Tuberculosis Interferon Gamma Release Assay, TB-IGRA）。这类试验采用酶联免疫吸附／酶联免疫斑点（Elisa／Elispot）方法，定量检测全血／外周血单个核细胞（PBMCs）在结核分枝杆菌特异性抗原刺激下释放γ-干扰素的水平，用于诊断潜伏性结核分支杆菌感染以及结核病。目前这类试验中，有两种较为成熟的方法，即Quanti FERON-TB GOLD试验(QFT-G)和T-SPOT TB试验。其对应的方法和试剂盒已先后被美国FDA批准应用于临床，美国CDC为其制定了使用指南。 二、TB-IGRA检测原理及方法 人体感染结核分枝杆菌后，能产生特异性T淋巴细胞，并存在于外周血中；外周血中的特异性T淋巴细胞再次接触结核抗原后被激活，并分泌γ-干扰素（IFN-γ）。 TB-IGRA试剂盒采用结核分枝杆菌特异抗原（卡介苗和大多数非结核杆菌中普遍缺失的RD1区编码的ESAT-6和CFP-10蛋白）在体外刺激待检测者的全血，经过培养后，采用Elisa（酶联免疫吸附）方法定量分析样本中γ-干扰素的释放水平，进而判断受试者结核分枝杆菌感染情况。 IGRA试剂已被发达国家广泛应用。2001年，使用该方法的试剂获得美国FDA批准应用于临床，并被美国CDC推荐为替代结核菌素试验（TST）的更有效方法，并为其制定了使用指南。2006年，英国国家卫生与临床优化研究所(The National Institute for Health and Clinical Excellence,NICE) 检测方法： 步骤1：IFN-γ体外释放 步骤2：IFN-γ定量检测 检测时间：2个工作日 三、TB-IGRA检测试剂的优势 TB-IGRA检测试剂盒，采用了目前欧美最先进、应用最成熟的结核检测技术，是国内结核检测的一个里程碑。相比常规的检测方法，它具备以下优势（TB-IGRA与常用TB检测方法对比见表3.1）： 基于特异性细胞免疫反应，具有高灵敏度，结核感染检出率达到85%以上，可用于潜伏感染的检测，有效提高早期感染检出能力； 采用结核分枝杆菌特异性抗原，排除卡介苗干扰，同时可鉴别非结核分枝杆菌肺部感染与肺结核； 全血样本体外检测，肺内结核与肺外结核都可以检测，检测过程更安全； 采用定量系统进行结果分析，可反应机体带菌情况，用于治疗效果跟踪及潜伏性感染监控； 表3.1 TB-IGRA与常用TB检测方法对比 细菌学诊断 免疫学诊断 涂片镜检