根癌农杆菌介导芜菁花叶病毒的Hc-Pro基因对茎用芥菜的遗传转化研讨.pdfVIP

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2018-01-16 发布于广东
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根癌农杆菌介导芜菁花叶病毒的Hc-Pro基因对茎用芥菜的遗传转化研讨.pdf

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目录目录 I ABBREVIATIONSIV 摘要V ABSTRACT VII 前言1 第一章文献综述3 第一节十字花科作物转基因研究进展3 1 转化受体 3 2 转化方法 4 2.1 载体介导转化法4 2.2 DNA 直接导入转化 5 2.3 种质系统介导转化法6 3 目的基因6 4 最佳转化系统及最高转化频率7 5 无选择标记基因转化 8 6 转基因存在的问题 9 7 前景 9 第二节转基因植物抗病毒机理10 第二章以子叶为外植体进行HC-PRO 基因的转化 13 1 材料与方法： 13 1.1 试验材料13 1.1.1 植物材料13 1.1.2 根癌农杆菌菌株及载体13 1.2 试验方法14 1.2.1 子叶的组织培养再生途径14 1.2.1.1 无菌苗的获得14 1.2.1.2 外植体的获得及不定芽的诱导14 1.2.1.3 不定芽的生长及生根14 1.2.2 基因转化途径14 1.2.2.1 外植体的预培养14 1.2.2.2 工程菌液的准备及侵染14 1.2.2.3 农杆菌与外植体共培养15 1.2.2.4 筛选、分化及生根15 1.2.2.5 培养基配制及培养条件15 1.2.3 数据的处理16 2 结果与分析 16 2.1 不定芽的诱导16 2.2 除草剂对子叶分化及苗生长的影响17 2.3 农杆菌对子叶的影响18 2.4 抗生素对子叶分化的影响20 2.5 转化条件对转化效率的影响20 I 2.6 转化频率21 3 讨论 22 3.1 除草剂（BASTA ）对不定芽的影响22 3.2 抗生素对子叶的影响24 3.3 农杆菌浓度对转化效率的影响24 3.4 预培养及共培养对转化效率的影响25 4 小结 25 第三章以愈伤组织为外植体进行HC-PRO 基因的转化 27 1 材料与方法 27 1.1 试验材料27 1.1.1 植物材料27 1.1.2 根癌农杆菌菌株及载体27 1.2 试验方法28 1.2.1 愈伤组织的诱导28 1.2.1.1 无菌苗的获得28 1.2.1.2 愈伤组织的诱导28 1.2.1.3 愈伤组织的分化28 1.2.2 基因转化途径28 1.2.2.1 外植体的准备28 1.2.2.2