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全国高等学校医学规划教材临床基础检验学:第三章 血液分析仪
第三章血液分析仪 KEY POINTS Basic content of hematology analyzers. Principles of hematology analyzer based on one or two classic methods, electrical impedance and (or) optical detection. Parameters from hematology analyzers and their clinical values. Characteristics and significances of blood cell histograms and scattergram. Function assessment of hematology analyzer. Case studies with application of parameters and histogram. 血液分析仪(hematology analyzer, HA):临床血液一般检查最常用仪器。 ?50年代,美国库尔特(W.H.Coulter)发明电子血细胞计数仪并申请专利。 第一节 检测原理 一、仪器基本结构 (一)机械系统 (二)电学系统 (三)光学系统 二、电阻抗法 (一)电阻抗原理(principle of electrical impedance),又称库尔特原理(Coulter principle) (二)白细胞计数和分类计数原理 仪器将体积为35~450fL的血细胞,分为256个通道(channel)。 每个通道:1.64fl。 根据细胞大小,分别置于不同的通道中,显示血细胞体积分布直方图(Histogram)。 经溶血素处理脱水后,血细胞体积大小发生了变化 第一群(35~90fl)小细胞区:淋巴细胞(体积最小):一般在35~90fl。 第二群(90~160fl)是单个核细胞区,(中间细胞): 单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等 第三群(160fl)大细胞区:嗜中性粒细胞(体积最大):一般在135-350fl 三分群血液分析仪正常白细胞分类模式图(直方图) (三)电阻抗法红细胞检测原理 红细胞计数和血细胞比容测定 与白细胞计数相似。 (四)电阻抗法血小板检测原理 血小板计数(platelet, PLT): 随红细胞在一个系统中进行检测。 直方图在2~28fl(不同仪器不一)。 血小板平均体积(mean platelet volume, MPV)。 (二)光散射法血液分析仪检测原理 组合应用 ☆电学 ☆光学 ☆细胞化学等 细胞流电学和光学检测图(AcT 5diff) (一)白细胞检测 1.容量、电导、光散射(volume,conductivity, scatter, VCS)法: VCS可显示3种细胞散点图 DF1(体积值和散射光值) DF2(体积值和电导值) DF3(体积值和电导值):只显示basophil 2.电阻抗与射频法(能透入细胞内,测量核的大小及颗粒的多少): ①嗜酸性粒细胞检测系统 ②嗜碱性粒细胞检测系统 ③5种白细胞分类检测系统:直流电(direct current,DC)为横坐标,以射频(radio frequency ,RF)为纵坐标。 ④幼稚细胞检测系统: 3.激光与细胞化学法 1)过氧化物酶检测通道; 2)嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道。 4.多角度偏振光散射(multi-angle polarized scatter separation of white cell, MAPSS)法 ①0°:前角光散射(1°~3°),可粗略测定细胞大小。 ②10°:狭角光散射(7°~11°),可测定细胞内部结构相对特征。 ③90°:垂直光散射(70°~110°),测定细胞核分叶情况。 ④90°:消偏振光散射(70°~110°),区分嗜酸性粒细胞与其他细胞。 (二)光散射法红细胞检测原理 低角度(2°~3°):测量红细胞体积 高角度(5°~15°):测定红细胞血红蛋白浓度 得到MCV、MCH、MCHC测定值,计算出RDW、红细胞血红蛋白分布宽度(red blood cell hemoglobin distribution width,HDW) (三)光散射法血小板检测原理 Mie理论(Mie theory of light scatter for homogeneous spheres):当球形化的血小板一个一个通过激光照射区时: 高角度(
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